TIÊU CHUẨN THỰC HIỆN CÔNG VIỆC

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo tuyệt đối vô trùng;
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp MPN;
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên 3 hoặc 5 ống môi trường tăng sinh chọn lọc LSB và ủ ở 37⁰C trong 48h;
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường LSB được cấy chuyền sang môi trường EC và ủ ở 44⁰C trong 24h;
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường EC được cấy chuyền sang môi trường EMB và ủ ở 37⁰C trong 24h;
  

• 
  Thử nghiệm IMViC được thực hiện trên môi trường thử nghiệm sinh hóa (MR-VP, SC Agar) đối với các khuẩn lạc đặc trưng trên môi trường EMB;
  

• 
  Kết quả khẳng định E. Coli được kết luận chính xác dựa vào thử nghiệm sinh hóa IMViC;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Số ống dương tính trên môi trường EC và thử nghiệm sinh hóa theo yêu cầu được xác định chính xác ở mỗi nồng độ pha loãng và tra bảng MPN tương ứng với kết quả;
  

• 
  Kết quả E. Coli trong mẫu được tính chính xác theo đúng công thức;
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ và thực hiện thao tác vô trùng theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Dự đoán được độ pha loãng mẫu phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu thải;
  

• 
  Thao tác cấy mẫu được thực hiện đúng theo phương pháp MPN;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo chỉ tiêu phân tích quy định;
  

• 
  Thao tác vận hành nồi hấp áp lực, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác;
  

• 
  Nhận định đúng dấu hiệu âm tính (dương tính) trên các môi trường nuôi cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa;
  

• 
  Thao tác cấy mẫu, cấy chuyền trên môi trường thành thạo;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu E. Coli;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân phân tích điện tử, tủ ấm;
  

• 
  Trình bày nguyên tắc pha loãng mẫu thập phân;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng;
  

• 
  Vận dụng được nguyên tắc của phương pháp MPN vào việc xác định E. Coli;
  

• 
  Nêu được các dấu hiệu dương tính trên các môi trường nuôi cấy, thử nghiệm sinh hóa;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, pipet, đĩa petri;
  

• 
  Môi trường canh thang LSB, canh thang EC;
  

• 
  Môi trường EMB, Môi trường rắn SC Agar;
  

• 
  Môi trường MR-VP;
  

• 
  Thuốc thử Kovac’s;
  

• 
  Thuốc thử Methyl Red;
  

• 
  Thuốc thử α-napthol;
  

• 
  Nồi hấp áp lực, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Bộ đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu E. coli: TCVN 6846:2007;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Chỉ tiêu E. Coli được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu được chuẩn bị đủ và đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo tuyệt đối vô trùng.
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp MPN.
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên 3 hoặc 5 ống môi trường tăng sinh chọn lọc LSB và ủ ở 37⁰C trong 48h.
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường LSB được cấy chuyền sang môi trường EC và ủ ở 44⁰C trong 24h.
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường EC được cấy chuyền sang môi trường EMB và ủ ở 37⁰C trong 24h.
  

Kiểm tra các ống dương tính.

• 
  Thử nghiệm IMViC được thực hiện trên môi trường thử nghiệm sinh hóa (MR-VP, SC Agar) đối với các khuẩn lạc đặc trưng trên môi trường EMB.
  

Kiểm tra các khuẩn lạc đặc trưng.

• 
  Kết quả khẳng định E. Coli được kết luận chính xác dựa vào thử nghiệm sinh hóa IMViC.
  

Kiểm tra kết quả khẳng định

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Số ống dương tính trên môi trường EC và thử nghiệm sinh hóa theo yêu cầu được xác định chính xác ở mỗi nồng độ pha loãng và tra bảng MPN tương ứng với kết quả.
  

Kiểm tra kết quả tra bảng.

• 
  Kết quả E. Coli trong mẫu được tính chính xác theo đúng công thức.
  

Kiểm tra công thức và kết quả tính.

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu, cấy mẫu, cấy chuyền, thực hiện phản ứng sinh hóa thành thạo.
  

• 
  Thao tác vận hành nồi hấp áp lực, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy thành thạo.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng phải đảm bảo vô trùng;
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu theo yêu cầu của phương pháp phân tích;
  

• 
  Mẫu được cấy vào môi trường thạch TSC đúng qui trình của phương pháp;
  

• 
  Mẫu sau khi cấy được lật ngược đĩa, cho vào các túi kỵ khí và nuôi ủ ở 37⁰C trong 24h;
  

• 
  Các khuẩn lạc đặc trưng trên các đĩa được đếm chính xác theo qui định;
  

• 
  Các khuẩn lạc điển hình được chọn để tiến hành thử phản ứng sinh hóa trên môi trường lỏng Thioglycolat resazurin natri và nuôi ủ ở 37⁰C trong 24h, điều kiện yếm khí;
  

• 
  Hình thể và tính chất của Clostridium perfringens sau khi nuôi cấy ở môi trường lỏng được xác định bằng quan sát và nhuộm Gram;
  

• 
  Tính chất lên men đường lactose – gelatin của Clostridium perfringens sau khi nuôi cấy ở môi trường lỏng được thử bằng cấy chuyền lên môi trường lactose – gelatin và nuôi ủ ở 37⁰C trong 24h;
  

• 
  Kết quả thử phản ứng sinh hóa được kết luận đúng;
  

• 
  Kết quả Clostridium perfringens trong mẫu được tính chính xác theo đúng công thức;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị, hóa chất đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu thập phân phù hợp với từng loại mẫu phân tích;
  

• 
  Vô trùng điều kiện thao tác;
  

• 
  Gieo cấy mẫu theo phương pháp đổ đĩa;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo quy định;
  

• 
  Thao tác vận hành cân phân tích, nồi hấp áp lực, máy đo pH, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu Clostridium perfringens;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân phân tích điện tử, máy đo pH, tủ ấm;
  

• 
  Nguyên tắc pha loãng mẫu thập phân;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng âm;
  

• 
  Trình bày được nguyên tắc và quy trình thực hiện phương pháp đổ đĩa;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, pipet, đĩa petri;
  

• 
  Môi trường Thạch TSC;
  

• 
  Dung dịch D-Cycloserin;
  

• 
  Môi trường thioglycolat lỏng;
  

• 
  Môi trường lactose-gelatin;
  

• 
  Nồi hấp áp lực, bếp điện, cân phân tích, máy đo pH, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Bộ đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu Clostridium perfringens: TCVN 4991: 2005;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu được chuẩn bị đủ và đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích.
  

• 
  Chỉ tiêu Clostridium perfringens được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng phải đảm bảo vô trùng.
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu theo yêu cầu của phương pháp phân tích.
  

• 
  Mẫu được cấy vào môi trường thạch TSC đúng qui trình của phương pháp.
  

• 
  Mẫu sau khi cấy được lật ngược đĩa, cho vào các túi kỵ khí và nuôi ủ ở 37⁰C trong 24h.
  

• 
  Các khuẩn lạc đặc trưng trên các đĩa được đếm chính xác theo qui định.
  

• 
  Các khuẩn lạc điển hình được chọn để tiến hành thử phản ứng sinh hóa trên môi trường lỏng Thioglycolat resazurin natri và nuôi ủ ở 37⁰C trong 24h, điều kiện yếm khí.
  

• 
  Hình thể và tính chất của Clostridium perfringens sau khi nuôi cấy ở môi trường lỏng được xác định bằng quan sát và nhuộm Gram.
  

• 
  Tính chất lên men đường lactose – gelatin của Clostridium perfringens sau khi nuôi cấy ở môi trường lỏng được thử bằng cấy chuyền lên môi trường lactose – gelatin và nuôi ủ ở 37⁰C trong 24h.
  

• 
  Kết quả thử phản ứng sinh hóa được kết luận đúng.
  

• 
  Kết quả Clostridium perfringens trong mẫu được tính chính xác theo đúng công thức
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác vận hành cân phân tích, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác.
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu, đổ đĩa, cấy chuyền lên môi trường lỏng, thử phản ứng sinh hóa thành thạo.
  

• 
  Môi trường dinh dưỡng và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng;
  

• 
  Mẫu được chuẩn bị phù hợp với từng loại thực phẩm, bổ sung môi trường BPW và nuôi ủ ở điều kiện phù hợp;
  

• 
  Mẫu sau tăng sinh được cấy chuyền sang môi trường tăng sinh chọn lọc (RVS, MKTTn) và nuôi ủ ở điều kiện phù hợp;
  

• 
  Mẫu được cấy chuyền từ môi trường tăng sinh chọn lọc sang môi trường phân biệt đặc trưng cho Samonella (XLD, HE, BS…) và nuôi ủ ở 37⁰C trong 22 -26h;
  

• 
  Các đĩa khuẩn lạc đặc trưng được sử dụng để thử nghiệm sinh hóa và thử nghiệm ngưng kết huyết thanh;
  

• 
  Kết quả thử nghiệm sinh hóa và thử nghiệm ngưng kết huyết thanh phải được kết luận đúng;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Kết quả phân tích được kết luận đúng và ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả, sổ lưu.