III. CÁC KỸ NĂNG VÀ KIẾN THỨC THIẾT YẾU

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Pha loãng mẫu thập phân phù hợp với tình trạng vi sinh của chỉ tiêu phân tích;
  

• 
  Vô trùng điều kiện thao tác kỹ lưỡng;
  

• 
  Thao tác cấy, đổ đĩa thực hiện đúng theo yêu cầu của phương pháp đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Nhận định đúng hiện tượng âm tính (dương tính) của khuẩn lạc trên các môi trường nuôi cấy mẫu;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo qui định của chỉ tiêu phân tích;
  

• 
  Vận hành cân phân tích, nồi hấp áp lực, tủ sấy, tủ ấm chuẩn xác;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí;
  

• 
  Mô tả qui trình vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân phân tích điện tử, tủ ấm;
  

• 
  Trình bày nguyên tắc pha loãng mẫu thập phân;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và qui trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng âm;
  

• 
  Trình bày được nguyên tắc và quy trình thực hiện phân tích chỉ tiêu theo phương pháp đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Nêu được các dấu hiệu dương tính của khuẩn lạc trên các môi trường nuôi cấy;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, đĩa petri, pipet;
  

• 
  Nồi hấp áp lực, bếp điện, cân phân tích, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy, máy và bút đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  DD nước muối sinh lý vô trùng;
  

• 
  DD đệm pepton;
  

• 
  DD nước muối pepton (SPW);
  

• 
  Môi trường thạch thường - glucose (PCA) hoặc thạch trypton - glucose (TGA) hoặc Nutrient Agar;
  

• 
  Môi trường thạch màng;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu Tổng số vi khuẩn hiếu khí;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu được chuẩn bị đủ và đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích.
  

• 
  Tổng số vi khuẩn hiếu khí được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng.
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu theo yêu cầu của phương pháp phân tích.
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên môi trường đã chuẩn bị.
  

• 
  Chế độ ủ được cài đặt theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích (30⁰C, 48- 72h)*.
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Các đĩa được chọn tính kết quả đảm bảo yêu cầu về số khuẩn lạc.
  

• 
  Tổng số vi khuẩn hiếu khí được xác định chính xác; kết quả giữa 2 lần phân tích không được lệch quá 10%.
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu, cấy mẫu, đếm khuẩn lạc thành thạo.
  

• 
  Thao tác vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân, tủ ấm thành thạo.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng;
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu theo yêu cầu của phương pháp phân tích;
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên môi trường đã chuẩn bị;
  

• 
  Các đĩa sau khi cấy mẫu phải được lật ngược đĩa khi ủ;
  

• 
  Chế độ ủ được cài đặt theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích (30⁰C, 48- 72h)*;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Các đĩa được chọn tính kết quả đảm bảo yêu cầu về số khuẩn lạc;
  

• 
  Tổng số bào tử nấm men, nấm mốc được xác định chính xác; kết quả giữa 2 lần phân tích không được lệch quá 10%;
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Pha loãng mẫu thập phân phù hợp với tình trạng vi sinh của chỉ tiêu phân tích;
  

• 
  Cấy mẫu theo phương pháp đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Nhận định đúng hiện tượng âm tính (dương tính) của khuẩn lạc trên các môi trường nuôi cấy mẫu;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm mẫu gieo cấy theo quy định;
  

• 
  Vận hành cân phân tích, nồi hấp áp lực, tủ sấy, tủ ấm chuẩn xác;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu tổng số bào tử nấm men nấm mốc;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân phân tích điện tử, tủ ấm;
  

• 
  Trình bày nguyên tắc pha loãng mẫu thập phân;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng âm;
  

• 
  Trình bày được nguyên tắc và quy trình thực hiện phương pháp đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Nêu được các dấu hiệu dương tính của khuẩn lạc trên các môi trường nuôi cấy;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, đĩa petri, pipet;
  

• 
  Nồi hấp áp lực, bếp điện, cân phân tích, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy, máy và bút đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  DD nước muối sinh lý vô trùng;
  

• 
  Môi trường thạch - cao nấm men - chloramphenicol (YGC);
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu tổng số bào tử nấm men nấm mốc;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu được chuẩn bị đủ và đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích.
  

• 
  Tổng số bào tử nấm men, nấm mốc được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng.
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu theo yêu cầu của phương pháp phân tích.
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên môi trường đã chuẩn bị.
  

• 
  Các đĩa sau khi cấy mẫu phải được lật ngược đĩa khi ủ.
  

• 
  Chế độ ủ được cài đặt theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích (30⁰C, 48- 72h)*.
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Các đĩa được chọn tính kết quả đảm bảo yêu cầu về số khuẩn lạc.
  

• 
  Tổng số bào tử nấm men, nấm mốc được xác định chính xác; kết quả giữa 2 lần phân tích không được lệch quá 10%.
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu, cấy mẫu, đếm khuẩn lạc thành thạo.
  

• 
  Thao tác vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân phân tích điện tử, tủ ấm.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo tuyệt đối vô trùng;
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp MPN;
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên 3 hoặc 5 ống môi trường tăng sinh chọn lọc LSB và ủ ở 37⁰C trong 48h;
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường LSB được cấy chuyền sang môi trường BGBL 2% và ủ ở 37⁰C trong 48h;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Số ống dương tính trên môi trường BGBL 2% được xác định chính xác ở mỗi nồng độ pha loãng và tra bảng MPN tương ứng với kết quả;
  

• 
  Kết quả Coliform tổng số trong mẫu được tính chính xác theo đúng công thức;
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ và thực hiện thao tác vô trùng theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Dự đoán được độ pha loãng mẫu phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu thải;
  

• 
  Cấy mẫu đúng theo phương pháp MPN;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo chỉ tiêu phân tích quy định;
  

• 
  Vận hành cân phân tích, nồi hấp áp lực, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác;
  

• 
  Nhận định đúng dấu hiệu âm tính (dương tính) trên các môi trường nuôi cấy mẫu;
  

• 
  Thao tác cấy mẫu, cấy chuyền trên môi trường thành thạo;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu Coliform tổng số;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, nồi hấp áp lực, cân phân tích điện tử, tủ ấm;
  

• 
  Trình bày nguyên tắc pha loãng mẫu thập phân;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng;
  

• 
  Vận dụng được nguyên tắc của phương pháp MPN vào việc xác định Coliform tổng số;
  

• 
  Nêu được các dấu hiệu dương tính trên các môi trường nuôi cấy;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, pipet, đĩa petri, ống Durham;
  

• 
  Môi trường LSB (Môi trường tăng sinh chọn lọc);
  

• 
  Môi trường BGBL 2% (Môi trường thử khẳng định);
  

• 
  Nồi hấp áp lực, bếp điện, cân phân tích, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Bộ đếm khuẩn lạc;
  

• 
  Các dung dịch khử trùng;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu Coliform tổng số: TCVN 4882: 2007;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Chỉ tiêu Coliform tổng số được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Các thiết bị, dụng cụ, hóa chất cần thiết được lựa chọn đủ theo yêu cầu của phương pháp phân tích ngay từ đầu.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo tuyệt đối vô trùng.
  

• 
  Mẫu được pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp MPN.
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên 3 hoặc 5 ống môi trường tăng sinh chọn lọc LSB và ủ ở 37⁰C trong 48h.
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường LSB được cấy chuyền sang môi trường BGBL 2% và ủ ở 37⁰C trong 48h.
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Số ống dương tính trên môi trường BGBL 2% được xác định chính xác ở mỗi nồng độ pha loãng và tra bảng MPN tương ứng với kết quả.
  

Kiểm tra kết quả tra bảng.

• 
  Kết quả Coliform tổng số trong mẫu được tính chính xác theo đúng công thức.
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu, cấy mẫu, cấy chuyền thành thạo.
  

• 
  Thao tác vận hành nồi hấp áp lực, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy thành thạo.