II. CÁC TIÊU CHÍ THỰC HIỆN

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng;
  

• 
  Mẫu được chuẩn bị phù hợp với từng loại thực phẩm, bổ sung môi trường APW và nuôi ủ ở điều kiện phù hợp (37⁰C trong 6-8h);
  

• 
  Mẫu sau tăng sinh được cấy ria sang môi trường tăng sinh chọn lọc TCBS và nuôi ủ ở điều kiện phù hợp (37⁰C trong 18 -22h);
  

• 
  Các khuẩn lạc đặc trưng cho Vibrio parahaemolyticus trên môi trường thạch TCBS được cấy chuyền sang môi trường không chọn lọc (thạch máu) và ủ qua đêm ở 37⁰C;
  

• 
  Các thử nghiệm trên các môi trường sinh hóa và thử nghiệm kháng huyết thanh trên huyết thanh O và huyết thanh K được thực hiện theo yêu cầu đối với Vibrio parahaemolyticus;
  

• 
  Các kết quả thử nghiệm sinh hóa và kháng huyết thanh trên huyết thanh O và huyết thanh K được kết luận chính xác;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Kết luận đúng về sự hiện diện của Vibrio parahaemolyticus trong mẫu phân tích;
  

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị, hóa chất đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Đồng nhất mẫu, cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa và thử nghiệm kháng huyết thanh thành thạo;
  

• 
  Vô trùng điều kiện thao tác;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo quy định;
  

• 
  Thao tác vận hành cân phân tích, nồi hấp áp lực, máy đo pH, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu Vibrio parahaemolyticus;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, cân, tủ ấm;
  

• 
  Trình bày được phương pháp đồng nhất mẫu, cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa và thử nghiệm kháng huyết thanh;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng âm;
  

• 
  Nhận biết được dấu hiệu cho biết mẫu dương tính trên môi trường APW, TCBS, thạch máu;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, pipe;
  

• 
  Môi trường APW;
  

• 
  Môi trường thạch TCBS;
  

• 
  Môi trường thạch máu;
  

• 
  Môi trường thử nghiệm sinh hóa;
  

• 
  Huyết thanh O và huyết thanh K;
  

• 
  Bếp điện, cân, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu Vibrio parahaemolyticus;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu được chuẩn bị đủ và đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích.
  

• 
  Chỉ tiêu Vibrio parahaemolyticus được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng.
  

• 
  Mẫu được chuẩn bị phù hợp với từng loại thực phẩm, bổ sung môi trường APW và nuôi ủ ở điều kiện phù hợp (37⁰C trong 6-8h).
  

• 
  Mẫu sau tăng sinh được cấy ria sang môi trường tăng sinh chọn lọc TCBS và nuôi ủ ở điều kiện phù hợp (37⁰C trong 18 -22h).
  

• 
  Các khuẩn lạc đặc trưng trên môi trường thạch TCBS được cấy chuyền sang môi trường không chọn lọc (thạch máu) và ủ qua đêm ở 37⁰C.
  

• 
  Các thử nghiệm trên các môi trường sinh hóa và thử nghiệm kháng huyết thanh trên huyết thanh O và huyết thanh K được thực hiện theo yêu cầu đối với Vibrio parahaemolyticus.
  

• 
  Các kết quả thử nghiệm sinh hóa và kháng huyết thanh trên huyết thanh O và huyết thanh K được kết luận chính xác.
  

đối với tài liệu kỹ thuật.

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Kết luận đúng về sự hiện diện của Vibrio parahaemolyticus trong mẫu phân tích.
  

đối với tài liệu kỹ thuật.

• 
  Kết quả phân tích được ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác vận hành cân phân tích, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác.
  

• 
  Thao tác đồng nhất mẫu, đổ đĩa, thực hiện thử nghiệm sinh hóa và kháng huyết thanh trên huyết thanh O và huyết thanh K thành thạo.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng;
  

• 
  Mẫu được đồng nhất, pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp phân tích;
  

• 
  Mẫu được cấy tăng sinh chọn lọc ban đầu trên môi trường canh thang nửa Fraser và ủ ở chế độ phù hợp;
  

• 
  Các ống môi trường canh thang nửa Fraser dương tính được cấy trên môi trường canh thang Fraser;
  

• 
  Thử nghiệm trên các khuẩn lạc điển hình được đánh dấu trên môi trường thạch Listeria và ủ ở chế độ phù hợp;
  

• 
  Thử nghiệm hình thái, sinh lý, sinh hóa trên môi trường đối với các khuẩn lạc đặc trưng được chọn lọc;
  

• 
  Các kết quả thử nghiệm được kết luận chính xác;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Kết quả phân tích được tính theo đúng công thức và ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị, hóa chất đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Vô trùng điều kiện thao tác;
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu thập phân, cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa thành thạo;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo quy định;
  

• 
  Thao tác vận hành cân phân tích, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu Listeria monocytogenes;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, cân, tủ ấm;
  

• 
  Trình bày được phương pháp pha loãng mẫu thập phân, cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa xác định Listeria monocytogenes;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng âm;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, pipet;
  

• 
  Môi trường đệm peptone;
  

• 
  Môi trường canh thang nửa Fraser;
  

• 
  Môi trường canh thang Fraser;
  

• 
  Môi trường thạch Listeria;
  

• 
  Môi trường hoàn chỉnh;
  

• 
  Môi trường thử nghiệm sinh hóa: thạch huyết cừu;
  

• 
  Bếp điện, cân, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu Listeria monocytogenes : TCVN 7700 -2: 2007;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.
  

• 
  Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu được chuẩn bị đủ và đúng theo yêu cầu của chỉ tiêu phân tích.
  

• 
  Chỉ tiêu Listeria monocytogenes được xác định theo đúng qui trình.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng.
  

• 
  Mẫu được đồng nhất, pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp phân tích.
  

• 
  Mẫu được cấy tăng sinh chọn lọc ban đầu trên môi trường canh thang nửa Fraser và ủ ở chế độ phù hợp.
  

• 
  Các ống môi trường canh thang nửa Fraser dương tính được cấy trên môi trường canh thang Fraser.
  

• 
  Thử nghiệm trên các khuẩn lạc điển hình được đánh dấu trên môi trường thạch Listeria và ủ ở chế độ phù hợp.
  

• 
  Thử nghiệm hình thái, sinh lý, sinh hóa trên môi trường đối với các khuẩn lạc đặc trưng được chọn lọc.
  

• 
  Các kết quả thử nghiệm được kết luận chính xác.
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính.
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật.
  

• 
  Kết quả phân tích được tính theo đúng công thức và ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Thao tác vận hành cân phân tích, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác.
  

• 
  Thao tác pha loãng mẫu, cấy mẫu, thực hiện thử nghiệm sinh hóa thành thạo.
  

• 
  Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng đảm bảo vô trùng;
  

• 
  Mẫu được đồng nhất, pha loãng và chọn các nồng độ phù hợp với đặc điểm vi sinh của từng loại mẫu, theo yêu cầu của phương pháp phân tích;
  

• 
  Mỗi nồng độ mẫu pha loãng đã chọn được cấy lên 3 hoặc 5 ống môi trường lỏng Rogor và ủ ở chế độ phù hợp (30⁰C, 5 ngày hoặc 37⁰C, 3 ngày);
  

• 
  Các ống dương tính trên môi trường lỏng Rogor được cấy lên môi trường thạch Rogor và ủ ở chế độ phù hợp (30⁰C, 5 ngày hoặc 37⁰C, 3 ngày);
  

• 
  Các khuẩn lạc đặc trưng trên môi trường thạch được chọn để thử nghiệm sinh hóa theo yêu cầu đối với Lactobacillus;
  

• 
  Kết quả của các thử nghiệm sinh hóa được kết luận chính xác;
  

• 
  Các mẫu thử nghiệm có kết quả khuẩn lạc không màu, đường kính 1-3mm, hình thấu kính hoặc hình sao, Gram (+), Catalase (-) được đọc chính xác theo từng nhóm nồng độ pha loãng và được tra bảng MPN tương ứng với kết quả;
  

• 
  Mẫu kiểm tra mức độ vô trùng của quá trình thực hiện đảm bảo âm tính;
  

• 
  Mẫu không được nhiễm chéo vi sinh vật;
  

• 
  Kết quả phân tích được tính theo đúng công thức và ghi chính xác vào phiếu ghi kết quả và sổ lưu.
  

• 
  Lựa chọn đúng, đầy đủ về số lượng, chủng loại dụng cụ, thiết bị, hóa chấtđún;g theo yêu cầu của chỉ tiêu, phương pháp phân tích;
  

• 
  Vệ sinh, khử trùng thiết bị, dụng cụ theo đúng phương pháp và yêu cầu;
  

• 
  Pha loãng mẫu thập phân, cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa thành thạo;
  

• 
  Vô trùng điều kiện thao tác;
  

• 
  Cài đặt đúng các thông số của chế độ ủ ấm theo quy định;
  

• 
  Thao tác vận hành cân, tủ ấm, tủ sấy chuẩn xác;
  

• 
  Tính toán kết quả theo đúng công thức, xử lý kết quả chính xác.
  

• 
  Trình bày được trình tự các bước tiến hành xác định chỉ tiêu Lactobacillus;
  

• 
  Mô tả quy trình vận hành tủ sấy, cân, tủ ấm;
  

• 
  Trình được phương pháp pha loãng mẫu, cấy mẫu, thử nghiệm sinh hóa đối với Lactobacillus;
  

• 
  Trình bày được yêu cầu và quy trình thao tác thực hiện mẫu đối chứng âm;
  

• 
  Trình bày được nguyên tắc và quy trình thực hiện phương pháp MPN;
  

• 
  Nhận biết được dấu hiệu mẫu dương tính trên môi trường Rogor;
  

• 
  Vận dụng đúng công thức tính kết quả vào từng trường hợp thực tế.
  

• 
  Cốc thủy tinh, nồi đun môi trường, đũa thủy tinh, ống nghiệm, bình tam giác, phễu thủy tinh, ống đong, pipet;
  

• 
  Môi trường Rogor lỏng;
  

• 
  Môi trường thạch Rogor;
  

• 
  Môi trường MRS lỏng;
  

• 
  Môi trường thạch MRS;
  

• 
  Môi trường thạch máu không chọn lọc;
  

• 
  Bếp điện, cân, tủ lưu giữ môi trường, tủ ấm, tủ sấy;
  

• 
  Phòng cấy (tủ cấy) vô trùng;
  

• 
  Các dung dịch khử khuẩn;
  

• 
  Tài liệu kỹ thuật phân tích chỉ tiêu Lactobacillus: TCVN 5522: 1991;
  

• 
  Phiếu ghi kết quả phân tích và sổ lưu.