42. Một số đặc trưng trong thích nghi axit
ở vi khuẩn Streptococcus mutans
Trần Thị Thanh1, Nguyễn Thị Mai Phương2, Phan Tuấn Nghĩa1
1Phòng Thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ Enzym và Protein,
Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN
2Viện Công nghệ Sinh học, Viện Khoa học và Công nghệ Quốc gia
Vi khuẩn Streptococcus mutans là tác nhân chính gây sâu răng do có khả năng sinh axit mạnh và chịu axit tốt. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phát hiện thấy rằng tế bào S. mutans GS-5 thích nghi axit có mức độ tiêu thụ oxy và tính thấm proton thấp hơn so với tế bào S. mutans GS-5 không thích nghi axit. Việc giảm tính thấm proton được chỉ ra là liên quan tới sự tăng hoạt độ F-ATPase, còn sự giảm mức độ tiêu thụ oxy là do giảm hoạt độ NADH oxidase. Nghiên cứu cũng cho thấy hoạt độ enzyme phosphoryl hóa đường và pyruvate kinase thấp hơn còn hoạt độ lactate dehydrogenase cao hơn ở tế bào S. mutans GS-5thích nghi axit so với tế bào S. mutans GS-5 không thích nghi axit.Tuy vậy, không có sự khác biệt về hoạt độ superoxide dismutase giữa tế bào S. mutans GS-5thích nghi axit và không thích nghi axit. Phổ protein điện di hai chiều mẫu dịch chiết tế bào S. mutans GS-5 cho thấy có tới 45 điểm protein khác biệt về mức độ biểu hiện ở tế bào thích nghi axit so với tế bào không thích nghi axit. Các protein này đang được nhận dạng để tìm hiểu vai trò của chúng trong đáp ứng stress axit ở S. mutans.
Additional characterization of acid adaptation
in Streptococcus mutans
Tran Thi Thanh1, Nguyen Thi Mai Phuong2, Phan Tuan Nghia1
2Institute of Biotechnology, Vietnamese Academic of Science and Technology
Streptococcus mutans is the major pathogen of dental caries because of its strong abilities in acidogenicity and aciduricity. Adaptation to acidic condition is one of the ways for Streptococcus mutans to surviveand proliferate at low pH. It was found in this study that the acid-adapted S. mutans GS-5 cells possess respiration and proton permeability at a lower level than the unadapted S. mutans GS-5 cells. Proton permeability reduction appeared to be related to increased F-ATPase activity; and lower respiration activity was related to decreased NADH oxidase activity. Glucose phosphotransferase and pyruvate kinase appeared to be less active, but lactate dehydrogenase was slightly more active in the acid-adapted S. mutans GS-5 cells those in the unadapted S. mutans GS-5 cells. However, there was no difference in superoxide dismutase activity between the acid-adapted and unadapted cells. On the 2-D gel electrophoresis, 45 protein spots were found to be expressed at a different level between the two types of cells. Identification of the differentially expressed proteins is in process to figure out their roles in acid response of S. mutans.
43. Phân lập, nuôi cấy và biệt hóa tế bào gốc
trung mô tĩnh mạch cuống rốn trẻ sơ sinh thành tế bào
giống tế bào tạo xương và tế bào cơ tim
Nguyễn Lai Thành1, Đặng Văn Đức1, Bùi Việt Anh1, Lê Đại1, Đỗ Doãn Lợi2
1Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN
2Trường Đại học Y Hà Nội
Tế bào gốc trung mô (MSCs) là tế bào có khả năng tăng sinh và biệt hóa thành nhiều dòng tế bào khác nhau có và không có nguồn gốc từ trung mô bao gồm tế bào mỡ, xương, sụn, gân, gan, cơ, thần kinh hay tế bào đảo tụy.
Mục đích của nghiên cứu này là phân lập và xác định đặc điểm của tế bào thu nhận từ lớp dưới nội mô của tĩnh mạnh cuống rốn về khả năng tạo dòng cũng như tiềm năng biệt hóa. Chúng tôi đã thu được những quần lạc tế bào có độ thuần nhất cao có hình thái của MSCs. Kết quả xác định đặc tính bằng dòng chảy tế bào (flow cytometry) cho thấy các tế bào đó âm tính với marker dòng máu CD34 lên tới 96,7% nhưng dương tính với các marker của MSCs là CD90 và CD73 với tỷ lệ rất cao tương ứng với 99,5% và 95,6% ở ngày nuôi cấy thứ 16 trở đi. Các tế bào này khi được kích ứng để biệt hóa thành tế bào tạo xương (có nguồn gốc từ trung mô) và tế bào cơ tim (không có nguồn gốc từ trung mô) đã có những thay đổi hình thái rõ ràng. Các tế bào tạo xương biệt hóa từ MSCs có sự tích lũy Canxi ở chất nền ngoại bào và dương tính với Alkaline phosphatase. Các tế bào cơ tim sau khi cảm ứng biệt hóa có thể quan sát thấy các sợi dọc và vân ngang cũng như biểu hiện rõ chuỗi nặng beta myosin của cơ tim.
Derivation, culture, and differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) from human umbilical cord vein into cardiac-like cells and osteogenic-like cells
Nguyen Lai Thanh1, Dang Van Duc1, Bui Viet Anh1, Le Dai1, Do Doan Loi2
1Faculty of Biology, Hanoi University of Science, VNU
2Hanoi Medical University
Mesenchymal stem cells - (MSCs) are multipotent stem cells that can differentiate into a variety of cell types of mesodermal or non-mesodermal lineage such as adipocytes, osteoblasts, chondrocytes, tendon cells, liver cells, myocytes, nerve cells, and beta-pancreatic islets cells.
This project is aimed to derivation of MSCs from umbilical cord vein and determination the abilities to differentiate into other cell types. We are succesfully isolated MSC from human umbilical cord vein with highly pure population. The MSCs were characterized with CD90 and CD73, which express in MSCs specifically, by Flow cytometric method. The rate of positive cells with those markers were up to 99.5% and 95.6%, respectively at the day 16 of culture since isolation. This cell population was cultured in special media to differentiate into cardiac cells and osteogenic cells. The cell mophorlogy changed obviously during the treatment period. Osteogenic-like cells showed evident of cancium accumulation and positive with alkaline phosphatase dyer. The cardiac-like cells with H-E staining presented the myofibrils and dark band of H-zone under optical microscop. They also were positively determined by Fluorescence-immunocytochemistry with beta-cardiac myosin heavy chain antibody.
