Nghiên cứu cáC ĐIỀu kiện nuôi cấY ĐỂ thu nhận chế phẩm enzyme chitinase thô

Bảng 4. Hiệu suất thu nhận CPE tương ứng các tác nhân tủa Tác nhân tủa

tải về 0.81 Mb.

Chế độ xem pdf

trang	12/13
Chuyển đổi dữ liệu	10.05.2023
Kích	0.81 Mb.
	#54666

1 ... 5 6 7 8 9 10 11 12 13

0,59 g/100ml Trước thẩm tích Sau thẩm tích (NH 4 ) 2 SO 4 5,54 g/100ml 0,35 g/100ml
Số 51 năm 2013 _____________________________________________________________________________________________________________ 128

Bảng 4. Hiệu suất thu nhận CPE tương ứng các tác nhân tủa

Tác nhân tủa
Khối lượng CPE trung bình thu được
sau khi tủa (g)
Aceton
0,24 g/100ml
Ethanol 96
o
0,59 g/100ml
Trước thẩm tích
Sau thẩm tích
(NH
4
)
2
SO
4
5,54 g/100ml
0,35 g/100ml
Từ kết quả Bảng 4, chúng tôi quyết định chọn tác nhân tủa để thu hồi CPE là
dung môi ethanol, dù hoạt độ CPE tủa bằng ethanol không cao bằng muối nhưng khối
lượng CPE thu bằng ethanol cao hơn rất nhiều so với muối. Điều này đáp ứng nhu cầu
của đề tài là tạo CPE trong phòng thí nghiệm.
3.3.2. Thu nhận CPE chitinase thô từ chủng Trichoderma BL2
* Nuôi Trichoderma BL2 trên MT bán rắn
Tiến hành nuôi Trichoderma BL2 trên MT5 với những điều kiện tối ưu đã xác
định, sau 60h thu dịch enzyme thô. Chúng tôi nhận thấy, sau 36h nuôi cấy bào tử màu
xanh của chủng nghiên cứu bắt đầu hình thành và bao phủ bề mặt cơ chất MT. Kết quả
được minh họa ở Hình 10.

T
ạp chí KHOA HỌC ĐHSP TPHCM
Số 51 năm 2013
_____________________________________________________________________________________________________________
128

(a) Sau 12h nuôi cấy
(b) Sau 36h nuôi cấy
Hình 10. Nuôi Trichoderma BL2 trên MT bán rắn

* Thu nhận chế phẩm enzyme
Sau 60h nuôi cấy, chúng tôi tiến hành chiết dịch enzyme bằng nước cất vô trùng.
Dịch chiết enzyme sẽ được lọc, li tâm lạnh để loại bỏ bào tử và tơ nấm, ta sẽ thu được
dịch enzyme thô màu vàng trong chứa chitinase, nước và các chất hòa tan khác. Sau đó,
sử dụng ethanol làm tác nhân tủa, ủ lạnh trong khoảng 12h, li tâm để thu tủa, sấy ở
nhiệt độ 35 – 40
o
C cho đến khô, xay mịn ta được CPE chitinase thô dạng bột. Kết quả
được minh họa ở Hình 11 và 12.

tải về 0.81 Mb.

Chia sẻ với bạn bè của bạn:

1 ... 5 6 7 8 9 10 11 12 13