Nghiên cứu cáC ĐIỀu kiện nuôi cấY ĐỂ thu nhận chế phẩm enzyme chitinase thô
Chiết tách enzyme và tạo chế phẩm enzyme (CPE) chitinase thô từ chủng
tải về 0.81 Mb. Chế độ xem pdf
|
- Điều hướng trang này:
- Bảng 3.
- TL2 - 1:3 60,409 ± 0,186 Ethanol 96 0
| 3.3. Chiết tách enzyme và tạo chế phẩm enzyme (CPE) chitinase thô từ chủng
Trichoderma BL2 3.3.1. Kết quả khảo sát ảnh hưởng của các tác nhân tủa đến hoạt tính của CPE chitinase Sau khi nuôi chủng Trichoderma BL2 trên MT5 với các điều kiện thích hợp để sinh chitinase cao nhất, tiến hành tủa enzyme với các tác nhân tủa tương ứng. Sử dụng CPE thu được sau khi tủa để xác định hoạt độ chitinase. Kết quả được trình bày trong Bảng 3. Bảng 3. Ảnh hưởng của tác nhân tủa lên hoạt tính của CPE chitinase Tác nhân tủa Tỉ lệ (TL) enzyme/ tác nhân tủa Hoạt độ chitinase (UI/gCPE) TL1- 1:2 33,401 ± 0,116 TL2 - 1:3 27,065 ± 0,146 Acetone TL3 - 1:4 26,964 ± 0,143 TL1 - 1:2 28,392 ± 0,186 TL2 - 1:3 60,409 ± 0,186 Ethanol 96 0 TL3 - 1:4 36,905 ± 0,140 TL1 - 60% 36,367 ± 0,227 TL2 - 70% 66,964 ± 0,124 Muối (NH 4 ) 2 SO 4 TL3 - 80% 48,149 ± 0,140 T ạp chí KHOA HỌC ĐHSP TPHCM Phạm Thị Lịch và tgk _____________________________________________________________________________________________________________ 127 Kết quả trên cho thấy: Đối với tác nhân tủa là acetone, hoạt độ chitinase cao nhất khi tỉ lệ giữa dịch chiết enzyme và dung môi là 1:2. Đối với tác nhân tủa là ethanol, hoạt độ chitinase cao nhất khi tỉ lệ giữa dịch chiết enzyme và dung môi là 1:3. So sánh giữa 2 tác nhân tủa là dung môi thì hoạt độ chitinase của CPE tủa bằng ethanol 96 0 cao hơn so với tác nhân acetone. CPE khi tủa bằng muối (NH 4 ) 2 SO 4 có hoạt độ khá cao ở hầu hết các tỉ lệ % độ bão hòa. Hoạt độ chitinase của CPE cao nhất (66,964 UI/gCPE) ở tỉ lệ độ bão hòa là 70%. So sánh 3 tác nhân tủa, thì CPE thu được khi tủa bằng muối (NH 4 ) 2 SO 4 có hoạt độ cao hơn. Tuy nhiên, trước khi chọn tác nhân tủa chính chúng tôi đã tiến hành khảo sát hiệu suất thu hồi CPE bằng phương pháp thẩm tích enzyme qua màng cellophane. Cho dung dịch enzyme vào cellophane, sau đó đặt cả túi vào nước cất hoặc dung dịch đệm pha loãng. Màng cellophane là màng bán thấm, có kích thước lỗ cho các chất có phân tử nhỏ xuyên và đi qua vào các dung dịch đệm loãng theo định luật khuếch tán. Còn lại trong màng là enzyme – protein có phân tử lớn. Kết quả được trình bày ở Bảng 4. tải về 0.81 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|