Nghiên cứu cáC ĐIỀu kiện nuôi cấY ĐỂ thu nhận chế phẩm enzyme chitinase thô
tải về 0.81 Mb. Chế độ xem pdf
|
- Điều hướng trang này:
- Số 51 năm 2013
| Phạm Thị Lịch và tgk
_____________________________________________________________________________________________________________ 125 Hình 8. Biểu đồ ảnh hưởng của độ ẩm MT ban đầu đến hoạt độ chitinase Kết quả cho thấy khoảng độ ẩm MT ban đầu thích hợp cho chủng Tri. BL2 tổng hợp enzyme chitinase hoạt độ cao là 55 – 65%, đạt cao nhất là ở mức 60%. Độ ẩm MT trên 70% thì hoạt độ chitnase giảm mạnh đáng kể. Qua kết quả trên chúng tôi chọn độ ẩm MT nuôi cấy ban đầu là 60% cho các TN sau. 3.2.7. Động thái quá trình sinh tổng hợp chitinase của Trichoderma BL2 Nuôi chủng Trichoderma BL2 trên MT5, cơ chất cảm ứng là chitin huyền phù 1,0% ở nhiệt độ 30 o C, pH 5, độ ẩm MT 60%. Sau 12 giờ thu mẫu 1 lần, để tiến hành xác định độ ẩm MT và pH dịch lên men, sau đó xác định hoạt độ chitinase của chủng này, kết quả được minh họa ở Hình 9. Hình 9. Đồ thị động thái quá trình sinh tổng hợp chitinase của Trichoderma BL2 Từ kết quả trên chúng tôi nhận thấy, trong khoảng thời gian đầu, pH môi trường nuôi cây tăng chậm. Điều này có thể giải thích là do trong thời gian đầu chủng Trichoderma BL2 bắt đầu sinh trưởng đã tạo ra các sản phẩm trao đổi chất trung gian là acid hữu cơ, nhưng đồng thời cũng bắt đầu sinh tổng hợp các loại để phân giải nguồn cơ chất là glucose, pepton, cao nấm men để sinh trưởng. Chính sự có mặt của các sản phẩm trao đổi chất này của quá trình phân giải đã làm pH môi trường có xu hướng tăng dần. pH môi trường bắt đầu tăng nhanh từ 6,10 đến 7,29 sau 60h nuôi cấy; sau đó pH môi trường tiếp tục tăng và khá ổn định. Đồng thời, trong suốt quá trình lên men chủng T ạp chí KHOA HỌC ĐHSP TPHCM Số 51 năm 2013 _____________________________________________________________________________________________________________ 126 Trichoderma BL2 đã thực hiện các quá trình oxi hóa phân giải cơ chất tạo sản phẩm, và tổng hợp enzyme làm độ ẩm MT ngày càng tăng. Qua đó, ta có thể thấy pH và độ ẩm của MT nuôi cấy tăng tỉ lệ thuận với sự biến thiên hoạt độ của chitinase. Hoạt độ chitinase của chủng bắt đầu tăng dần từ thời điểm 12h, đến thời điểm 48h nuôi cấy sinh khối NS nghiên cứu đã tăng rất cao, và nguồn dinh dưỡng dễ hấp thu như glucose, pepton… dần cạn kiệt, thúc đẩy sự tổng hợp enzyme chitinase của chủng Trichoderma BL2. Khi chitinase được tổng hợp nhiều và tăng cường hoạt động phân cắt chitin, song song đó hoạt độ chitinase đạt giá trị cực đại. Như vậy, sau 60h hoạt độ chitinase đã đạt giá trị cao nhất. Sau 72h hoạt độ enzyme bắt đầu giảm. Kết quả thời gian này thay đổi so với kết quả khảo sát ảnh hưởng của thời gian đến hoạt độ chitinase ban đầu. Nguyên nhân là khi tập trung các điều kiện tối ưu lại thì các yếu tố MT sẽ tác động đồng thời lên chủng Trichoderma BL2 làm thời gian thu được chitinase có hoạt độ cao được rút ngắn. Như vậy, để thu nhận chitinase thô từ chủng Trichoderma BL2 có thể tiến hành nuôi cấy đến thời điểm 48h – 72h, tốt nhất là 60h trong MT 9 có pH môi trường ban đầu là 5,0 độ ẩm MT ban đầu là 60%. tải về 0.81 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|