Nghiên cứu cáC ĐIỀu kiện nuôi cấY ĐỂ thu nhận chế phẩm enzyme chitinase thô
tải về 0.81 Mb. Chế độ xem pdf
|
- Điều hướng trang này:
- Số 51 năm 2013
| Phạm Thị Lịch và tgk
_____________________________________________________________________________________________________________ 121 hướng giảm do MT không còn chitin, tế bào NS lúc này đã chuyển sang pha sinh trưởng chậm dần. Ở MT4, hoạt tính chitinase cũng có sự thay đổi rõ rệt theo thời gian nuôi cấy. Sau 48h nuôi cấy, hoạt tính chitinase đã tăng mạnh. Điều này chứng tỏ pepton có trong MT là nguồn dinh dưỡng dễ hấp thu, vì thế mà chủng Trichoderma BL2 đã sử dụng pepton để gia tăng sinh khối trong thời gian ngắn. Khi lượng sinh khối tăng cao, đồng thời với sự cạn kiệt pepton trong MT đã đẩy nhanh sự tổng hợp enzyme chitinase để phân giải chitin thành các sản phẩm đơn giản phục vụ cho sự tăng trưởng. Vì vậy, mà ở thời điểm 72h nuôi cấy, hoạt tính chitinase đạt cao nhất, và sau đó đã giảm dần khi nguồn chitin trong MT bắt đầu giảm. Ở MT5, hoạt tính chitinase cũng thay đổi rõ rệt theo thời gian nuôi cấy. Tăng mạnh chỉ sau 24h nuôi cấy và đạt cực đại ở 72h, đến 96h hoạt tính giảm dần. Điều này chứng tỏ, trong thời gian đầu chủng NS nghiên cứu đã đồng hóa mạnh các nguồn cacbon và nitơ dễ hấp thu để gia tăng sinh khối. Sau 48h lượng sinh khối trong MT đã tăng rất nhiều, mà nguồn dinh dưỡng dễ hấp thu đã cạn kiệt, vì vậy thúc đẩy chủng Trichoderma BL2 tiếp tục tổng hợp chitinase để phân giải nguồn chitin có trong MT và sau 72h nuôi cấy hoạt độ chitinase được ghi nhận là cao nhất. Sau đó, khi nguồn chitin trong MT đã bị phân cắt hết đồng thời khi các sản phẩm cuối như N-acetyl-D glucosamine có nhiều trong MT đã gây ức chế ngược lại quá trình sinh tổng hợp chitinase nên hoạt tính chitinase có xu hướng giảm. So sánh hiệu quả tổng hợp và hoạt độ chitinase của chủng Trichoderma BL2 trên cả 3 MT chúng tôi nhận thấy MT nuôi cấy đã ảnh hưởng trực tiếp đến hoạt độ chitinase. Mặc dù, thời gian để chủng NS nghiên cứu tổng hợp chitinase nhiều và hoạt độ cao ở MT3 là nhanh nhất, nhưng hoạt độ lại không cao, nên chúng tôi không chọn MT3 làm MT nuôi cấy tiếp theo. MT4 và 5 đều là những MT giàu dinh dưỡng, không chỉ thuận lợi cho sự tăng trưởng sinh khối của Trichoderma mà còn tạo điều kiện cho chủng này sinh tổng hợp các loại enzyme thủy phân để sử dụng nguồn dinh dưỡng MT, trong đó có chitinase. So sánh sự biến thiên hoạt độ chitinase ở MT4 và 5, chúng tôi nhận thấy tốc độ và thời gian gia tăng hoạt tính chitinase ở 2 MT tương đối giống nhau; nhưng ở MT5 giá trị hoạt độ chitinase đạt cao hơn. Vì thế, chúng tôi quyết định chọn MT5 và thời gian ban đầu để thu nhận enzyme chitinase là 72h cho các thí nghiệm (TN) sau. 3.2.2. Ảnh hưởng của cơ chất cảm ứng Nuôi chủng Trichoderma BL2 trên MT5, trong đó sử dụng cơ chất cảm ứng lần lượt thay đổi là bột vỏ tôm, bột vỏ cua, bột chitin, chitin huyền phù 1%. Sau 3 ngày thu dịch enzyme thô, tiến hành xác định hoạt độ enzyme chitinase, kết quả được thể hiện ở Hình 5. T ạp chí KHOA HỌC ĐHSP TPHCM Số 51 năm 2013 _____________________________________________________________________________________________________________ 122 tải về 0.81 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|