HÀ NỘI 2010 Lời nói đầu qcvn 4-10 : 2010/byt do Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về Phụ gia thực phẩm và chất hỗ trợ chế biến biên soạn

tải về 0.91 Mb.

trang	13/25
Chuyển đổi dữ liệu	07.09.2016
Kích	0.91 Mb.
	#31773

1 ... 9 10 11 12 13 14 15 16 ... 25

Phụ lục XV

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CHLOROPHYLL

1. Tên khác, chỉ số	Magnesium chlorophyll, Magnesium phaeophytin; Clorophyllin; C.I. Natural Green 3; C.I. (1975): 75810; INS 140 ADI "không giới hạn" .
2. Định nghĩa	Thu được bằng cách chiết cỏ, cỏ linh lăng, tầm ma và các nguyên liệu thực vật khác với dung môi; Sản phẩm sau khi đã loại dung môi ở dạng kết hợp với magnesi, có thể loại hoàn toàn hoặc 1 phần từ clorophyll để thu được phaeophytin tương ứng; Thành phần màu chính là các phaeophytin và magnesi clorophyll. Sản phẩm chiết sau khi loại dung môi chứa các chất màu khác như carotenoid, sáp và chất béo có nguồn gốc từ nguyên liệu. Chỉ được sử dụng những dung môi sau để chiết: aceton, dicloromethan, methanol, ethanol, propan-2-ol và hexan.
Tên hóa học	Các chất màu chính là: Phytyl (13²R,17S,18S)-3-(8-ethyl-13²-methoxycarbonyl-2,7,12,18-tetramethyl-13'-oxo-3-vinyl-13¹-13²-17,18-tetrahydrocyclopenta [at]-prophylrin-17-yl) propionat (Pheophytin a), hoặc phức magnesi (Clorophyll a). Phytyl (13²R,17S,18S)-3-(8-ethyl-7-formyl-13²-methoxycarbonyl-2,12,18-trimethyl-13'-oxo-3-vinyl-13¹-13²-17,18-tetrahydro-cyclopenta [at]-prophylrin-17-yl) propionat, (Pheophytin b), hoặc phức magnesi (Clorophyll b).
Mã số C.A.S.	Phaeophytin a, phức magnesi: 479-61-8 Phaeophytin b, phức magnesi: 519-62-0
Công thức hóa học	Phức magnesi phaeophytin a (Clorophyll a): C₅₅H₇₂MgN₄O₅ Phaeophytin a: C₅₅H₇₄N₄O₅ Phức magnesi phaeophytin b (Clorophyll a): C₅₅H₇₀MgN₄O₆ Phaeophytin b: C₅₅H₇₂N₄O₆
Công thức cấu tạo	Trong đó: X = CH₃ đối với các hợp chất "a" X = CHO đối với các hợp chất "b". Mất Mg sẽ chuyển dạng từ clorophyll thành phaeophytin
Khối lượng phân tử	Phức magnesi phaeophytin a (Clorophyll a): 893,51 Phaeophytin a: 871,22 Phức magnesi phaeophytin (Clorophyll a): 907,49 Phaeophytin : 885,20
3. Cảm quan	Chất rắn dạng sáp có màu từ xanh oliu đến xanh lục thẫm tùy thuộc vào lượng magnesi kết hợp.
4. Chức năng	Phẩm màu.
5. Yêu cầu kỹ thuật
5.1. Định tính
Độ tan	Không tan trong nước; tan trong cồn, diethyl ether; cloroalkan, hydrocarbon và dầu không bay hơi.
Sắc ký lớp mỏng	Đạt yêu cầu (mô tả trong phần phương pháp thử)
5.2. Độ tinh khiết
Dung môi tồn dư	Aceton, methanol, ethanol, propan-2-ol, hexan: Không được quá 50 mg/kg, đơn chất hoặc kết hợp. Dicloromethan: Không được quá 10 mg/kg
Arsen	Không được quá 3 mg/kg. (Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4 - Phương pháp II).
Chì	Không được quá 5 mg/kg. (Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4. Sử dụng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp để xác định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1-Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ).
5.3. Hàm lượng	Tổng hàm lượng các phaeophytin và các phức magnesi của nó không thấp hơn 10%.
6. Phương pháp thử
6.1. Định tính
Sắc ký lớp mỏng	Chấm dung dịch mẫu thử 1/20 trong cloroform lên bản mỏng Silica 60C thành 1 vạch dài 2 cm. Sau khi bản mỏng khô, khai triển bản mỏng trong hệ dung môi gồm 50% hexan, 45%
	cloroform và 5% ethanol (thông thường cloroform với độ tinh khiết thuốc thử đã chứa sẵn 2% ethanol để làm ổn định. 5% ethanol là không tính đến lượng ethanol có sẵn này) đến khi tuyến dung môi đạt 15 cm cách điểm xuất phát. Để dung môi bay hơi, sau đó quan sát các vết riêng biệt và xác định vết tương ứng với cấu tử quan tâm thông qua R_f và màu. Giá trị R_f gần đúng và màu của các vết như sau: phaeophytin a: 0,77; màu xám/nâu phaeophytin b: 0,75; màu vàng/nâu Clorophyll a: 0,50; màu xanh lam/xanh lục Clorophyll b: 0,63; màu vàng/xanh lục Ngoài ra còn quan sát thấy các vết của -caroten tại R_f 0,81 và xanthophyll tại R_f0,47 và 0,23.
6.2. Độ tinh khiết
Dung môi tồn dư	Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4. Xác định bằnh Sắc ký khí hoặc bằng phương pháp cất cuốn (chuyên luận Xác định dung môi tồn dư) hoặc phân tích không gian hơi (chuyên luận Thử giới hạn dung môi tồn dư).
Arsen	- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4 - Phương pháp II.
Chì	- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4. - Sử dụng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp để xác định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1-Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ).
6.1. Định lượng	Cân khoảng 100 mg (chính xác đến mg) mẫu thử, hòa tan trong diethyl ether đến đủ 100 ml. Lấy 2 ml dung dịch này, pha loãng với diethyl ether vừa đủ 25 ml. Độ hấp thụ quang của mẫu tại nồng độ này khi đo tại bước sóng 660,4 nm không được vượt quá 0,7 so với thang đo độ hấp thụ. Đo độ hấp thụ quang (A) của dung dịch này trong cuvet 1 cm so với mẫu trắng là diethyl ether tại bước sóng 660,4 nm; 642,0 nm; 667,2 nm; 654,4 nm. (các bước sóng này lần lượt là cực đại hấp thụ trong diethyl ether của clorphyll a; clorophyll b; phaeophtin a và đồng phaeophytin b, tương ứng). Ngoài ra đo thêm tại bước sóng 649,8 nm và 628,2 nm. Phần dung dịch đã pha loãng còn lại, thêm vào 1 tinh thể acid oxalic, hòa tan và lắc đều. Đo lại độ hấp thụ quang của dung dịch tại các bước sóng đã cho. "A" là sự chênh lệch độ hấp thụ quang của dung dịch đo tại cùng bước sóng trước và sau khi thêm acid oxalic. Tính nồng độ từng chất (mol/L) theo các phương trình sau: Clorophyll a = 17,7  A (660,4 nm) + 7,15  A (642,0 nm) Clorophyll b = 19,4  A (642,0 nm) - 2,92  A (660,4 nm) Phaeophytin a = -4,89 A (649,8 nm) + 0,0549 A (628,2 nm) +18,7 A (667,2 nm) + 0,0575 A (654,4 nm) - clorophyll a Phaeophytin b = -71,0 A (649,8 nm) + 2,51 A (628,2 nm) - 13,5 A (667,2 nm) + 84,3 A (654,4 nm) - clorophyll b Chuyển từ mol/L sang hàm lượng % theo phương trình sau: