Báo cáo tổng kếT ĐỀ TÀi nghiên cứu khoa học của sinh viên nghiên cứu tách chiếT Β-glucan
tải về 1.19 Mb.
|
Lê Xuân Lộc - Thuyết minh NCKH SV 2021
- Điều hướng trang này:
- Mục đích
- Tiến hành thí nghiệm
| Định phân:
Kết quả Hàm lượng nitơ tổng số trong mẫu được tính dựa trên công thức Mẫu rắn: N = 0,0014*VH2SO4*100/m (%) Mẫu lỏng: N = 0,0014*VH2SO4*1000/V (mgN/mL) N: Hàm lượng nitơ tổng số V: thể tích nguyên liệu đem phân tích (mL) m: trọng lượng mẫu đem phân tích (g) 0,0014: Số g N tương đương với 1 mL H2SO4 0,1N Protein tổng số trong nguyên liệu được xác định bằng cách nhân hàm lượng nitơ tổng số với hệ số đặc trưng cho protein (k = a, b, c). Tính toán trong thí nghiệm Mkhô = mướt * (100 – Độ ẩm) N = (0,0014 * (V2 – V1) * 100)/mkhô Đạm tổng = N * 6,25 1.8.2. Ảnh hưởng của nồng độ NaOH trong quá trình thu nhận β-glucan tổng sốMục đích: xác định nồng độ NaOH thích hợp để thu được β-glucan tổng số ít nhiễm tạp chất nhất. Phương pháp thực hiện: Dùng NaOH với các nồng độ khác nhau để chiết tách β-glucan. Xác định hàm lượng đường hexose trong sản phẩm thu được bằng phương pháp đo OD ở bước sóng 490 nm. Xác định nồng độ NaOH thích hợp để chiết tách β-glucan ít bị nhiễm tạp chất. Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 1 nhân tố: Nồng độ NaOH: 2%, 2,5%, 3% và 3,5% (w/v). Thí nghiệm được lặp lại 3 lần. Chỉ tiêu đánh giá: độ tinh sạch của β-glucan, chọn nồng độ NaOH thích hợp cho quá trinh chiết tách β-glucan. Tiến hành thí nghiệm Xử lý phần vỏ tế bào nấm men (Phạm Việt Cường, 2009): Ủ phần cặn thu được sau khi ly tâm thu yeast extract với NaOH 3,3% (w/v) trong 18 giờ ở 75ºC. Làm nguội đến 40ºC, bổ sung nước cất, lắc đều và ly tâm ở 4000 vòng/phút trong 10 phút, thu phần cặn. Bổ sung NaOH 3,3%, khuấy đều ở 75ºC trong 1 giờ. Để nguội đến 30ºC, bổ sung nước cất với tỉ lệ 1:1 (v/v), ly tâm ở 4000 vòng/phút trong 10 phút, thu phần cặn (vỏ tế bào nấm men). Chiết tách β-glucan: Cân 30 gam vỏ tế bào nấm men cho vào bình thể tích 1 lít, thêm vào 900 mL NaOH ở các nồng độ 2%; 2,5%; 3% và 3,5%; khuấy đều ở 75ºC trong 2 giờ. Ly tâm ở 4000 vòng/phút trong 10 phút, thu phần cặn. Thêm 200 mL cồn tuyệt đối, khuấy đều và để trong 10 phút, ly tâm ở 4000 vòng/phút trong 10 phút, thu phần cặn, lặp lại bước này 2 lần. Thêm 200 mL dietylete, khuấy đều và để trong 10 phút, ly tâm ở 4000 vòng/phút trong 10 phút thu phần cặn và làm khô bằng không khí ở 45ºC. Xác định nồng độ đường hexose trong sản phẩm bằng phương pháp Phenol-sulfuric acid (PSA) ở bước sóng 490 nm (Miller, 2010). Dựa vào kết quả, xác định nồng độ NaOH thích hợp cho quá trình chiết tách β-glucan. tải về 1.19 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|