Phân lập và tuyển chọn VI khuẩn có khả NĂng phân hủy protein và cellulose từ CÁc nguồn rác thải hữu cơ
tải về 0.53 Mb. Chế độ xem pdf
|
- Điều hướng trang này:
- Chỉ tiêu theo dõi
- 2.4. Định danh các dòng VK có tiềm năng xử lý rác
- Xử lý số liệu
| Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí hoàn
toàn ngẫu nhiên với các nghiệm thức tương ứng với các dòng VK được chủng cho trùn và 3 lần lặp lại cho mỗi nghiệm thức. Mỗi hộp đựng giá thể được thả 15 con trùn quế trưởng thành, sau đó cho 3 mL dung dịch huyền phù của VK vào hộp chứa giá thể và trùn với mật số VK đạt 10 6 CFU/g giá thể trong hộp nhựa. Nghiệm thức đối chứng không chủng VK và được sử dụng nước cất để tạo ẩm độ cho giá thể. Ẩm độ của giá thể nuôi trùn được điều chỉnh về đạt 55% sử dụng nước cất đã được tiệt trùng. Thí nghiệm được thực hiện trong điều kiện tối và trong thời gian 7 ngày. Chỉ tiêu theo dõi: Đếm số lượng trùn quế sống sót và đánh giá tình trạng của trùn quế sau 7 ngày ủ với VK với chỉ tiêu đánh giá bao gồm trùn di chuyển nhanh khi đưa ra ngoài ánh sáng là biểu hiện của trùn phát triển bình thường, nếu trùn không di chuyển hoặc chỉ cử động tại chỗ được xem là trùn bị ảnh hưởng. 2.4. Định danh các dòng VK có tiềm năng xử lý rác Ba dòng VK có tiềm năng phân hủy thịt vụn, cá vụn và 3 dòng VK có khả năng phân hủy rau cải thải được nhân nuôi trong môi trường chuyên biệt cho nhóm VK phân giải protein và nhóm VK phân hủy cellulose, sau đó tiến hành thu sinh khối của các dòng VK và tiến hành trích DNA của VK theo phương pháp được sử dụng tại Bộ môn Công nghệ Sinh học, Viện Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Cần Thơ. Phản ứng PCR được thực hiện sử dụng cặp mồi 27F(5’- AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’) /1492R (5’ - GGTTACCTTGTTACGACTT-3’) giải mã vùng 16S rRNA (Weisburg et al., 1991). Các sản phẩm PCR được gửi giải trình tự ở công ty First BASE Laboratories Sdn Bhd, Malaysia. Trình tự đoạn gene 16S rRNA được so sánh với cơ sở dữ liệu của ngân hàng gene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov bằng chương trình BLAST N). Kết quả định danh xác định đến mức độ loài của 5 dòng VK khi độ tương đồng của trình tự 16S rRNA của VK đạt trên 98%. Xử lý số liệu Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ Tập 57, Số Chuyên đề Môi trường và Biến đổi khí hậu (2021)(1): 34-41 37 Các số liệu thí nghiệm về khả năng phân hủy VLHC của các dòng VK được tổng hợp và xử lý bằng phần mềm Excel 2016. Khác biệt trung bình giữa các nghiệm thức thí nghiệm được thống kê theo phương pháp phân tích phương sai một nhân tố (One-way ANOVA), sử dụng phần mềm Minitab 16 và kiểm định Tukey với khác biệt ở mức ý nghĩa 5%. tải về 0.53 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|