TIÊu chuẩn quốc gia tcvn 10640: 2014 en 15850: 2010
tải về 0.72 Mb.
|
| TIÊU CHUẨN QUỐC GIA
TCVN 10640:2014 EN 15850:2010 THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH ZEARALENON TRONG THỰC PHẨM CHỨA NGÔ, BỘT ĐẠI MẠCH, BỘT NGÔ, BỘT NGÔ DẠNG NHUYỄN, BỘT MÌ VÀ NGŨ CỐC DÀNH CHO TRẺ SƠ SINH VÀ TRẺ NHỎ - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) CÓ LÀM SẠCH BẰNG CỘT ÁI LỰC MIỄN NHIỄM VÀ SỬ DỤNG DETECTOR HUỲNH QUANG Foodstuffs - Determination of zearanlenone in maize based baby food, barley flour, maize flour, polenta, wheat flour and cereal based foods for infants and young children - HPLC method with immunoaffinity column cleanup and fluorescence detection Lời nói đầu TCVN 10640:2014 hoàn toàn tương đương với EN 15850:2010; TCVN 10640:2014 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.
1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định zearalenon trong ngô, bột đại mạch, bột ngô, bột ngô dạng nhuyễn, bột mì và ngũ cốc dành cho trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) có làm sạch bằng cột ái lực miễn nhiễm và sử dụng detector huỳnh quang. Phương pháp này đã được đánh giá xác nhận trong hai nghiên cứu liên phòng. Nghiên cứu đầu tiên phân tích các mẫu thức ăn cho trẻ nhỏ chứa ngô, bột đại mạch, bột ngô, bột ngô dạng nhuyễn, bột mì chứa zearalenon trong dải từ 10 g/kg đến 335 g/kg và nghiên cứu thứ hai đối với các mẫu ngũ cốc dành cho trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ chứa zearalenon trong dải từ 9 g/kg đến 44 g/kg. Thông tin thêm về đánh giá xác nhận, xem Điều 9 và Phụ lục B. 2. Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có). TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử. 3. Nguyên tắc Phần mẫu thử được chiết bằng dung dịch metanol hoặc axetonitril tùy thuộc vào sản phẩm được phân tích. Dịch chiết thu được sau đó được pha loãng bằng dung dịch nước muối đệm phosphat (PBS) và được đưa lên cột ái lực miễn nhiễm chứa các kháng thể đặc thù đối với zearalenon. Zearalenon được tinh sạch và làm giàu trên cột và được tách ra khỏi các kháng thể sử dụng axetonitril hoặc metanol làm dung môi rửa giải. Zearalenon được định lượng bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo (RP-HPLC) với detector huỳnh quang. 4. Thuốc thử 4.1. Yêu cầu chung Chỉ sử dụng các thuốc thử loại tinh khiết phân tích và nước phù hợp với loại 1 trong TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987), trừ khi có quy định khác. Dung môi phải đạt chất lượng để phân tích HPLC, trừ khi có quy định khác. Có thể sử dụng các dung dịch bán sẵn có đặc tính tương đương với các dung dịch đã được liệt kê dưới đây 4.2. Dinatri hydro phosphat, Na2HPO4 khan hoặc Na2HPO4.12H2O. 4.3. Kali clorua (KCI). 4.4. Kali dihydro phosphat, KH2PO4. 4.5. Natri clorua (NaCI). 4.6. Natri hydroxit (NaOH). 4.7. Dung dịch axit clohydric, w(HCI) = 37 % khối lượng trong nước. 4.8. Dung dịch axit clohydric, c(HCI) = 0,1 mol/l. Pha loãng 8,28 ml dung dịch axit clohydric (4.7) trong nước đến 1 lít. 4.9. Dung dịch natri hydroxit, c(NaOH) = 0,1 mol/l. Hòa tan 4 g natri hydroxit (4.6) trong 1 lít nước. 4.10. Dung dịch nước muối đệm phosphat (PBS), c(NaCI) = 120 mmol/l, c(KCI) = 2,7 mmol/l, c(đệm phosphat) = 10 mmol/l, pH = 7,4. Hòa tan 8,0 g natri clorua (4.5), 1,2 g dinatri hydro phosphat khan hoặc 2,9 g Na2HPO4.12H2O (4.2), 0,2 g kali dihydro phosphat (4.4) và 0,2 g kali clorua (4.3) trong 900 ml nước. Sau khi hòa tan, chỉnh pH đến 7.4 bằng dung dịch axit clohydric (4.8) hoặc dung dịch natri hydroxit (4.9), sau đó pha loãng bằng nước đến 1 lít. Ngoài ra, có thể chuẩn bị dung dịch PBS có các đặc tính tương đương từ PBS bán sẵn trên thị trường.
Trộn 75 thể tích axetonitril (4.11) với 25 thể tích nước. 4.15. Dung môi A dùng cho phân tích HPLC Trộn 4 thể tích axetonitril (4.11) với 6 thể tích nước. 4.16. Pha động A dùng cho HPLC Trộn 53 thể tích axetonitril (4.11) với 47 thể tích nước. Lọc và khử khí pha động HPLC trước khi sử dụng. 4.17. Dung môi chiết B Trộn 75 thể tích metanol (4.13) với 25 thể tích nước. 4.18. Dung môi rửa Trộn 15 thể tích metanol (4.12) với 85 thể tích PBS (4.10). 4.19. Dung môi bơm B dùng cho phân tích HPLC Trộn 5 thể tích metanol (4.12) với 5 thể tích nước. 4.20. Pha động B dùng cho HPLC Trộn 75 thể tích metanol (4.12) với 25 thể tích nước. Lọc và khử khí pha động HPLC trước khi sử dụng. 4.21. Cột ái lực miễn nhiễm Cột ái lực miễn nhiễm chứa các kháng thể hấp thu zearalenon. Cột có khả năng tách được không nhỏ hơn 1 500 ng zearalenon và có độ thu hồi không nhỏ hơn 80 % khi dùng 10 ml dịch chiết chứa 75 ng zearalenon trong hỗn hợp của 15 thể tích metanol và 85 thể tích PBS. 4.22. Zearalenon, dạng tinh thể hoặc dạng màng trong ampun, độ tinh khiết không nhỏ hơn 98 % phần khối lượng hoặc ở dạng dung dịch zearlenon có bán sẵn trên thị trường. Cảnh báo - Zearalenon là hợp chất oestrogen và cần được xử lý đặc biệt cẩn thận. Luôn phải mang găng tay và kính bảo hộ, giai đoạn chuẩn bị mẫu và chất chuẩn phải được thực hiện trong tủ hút. 4.23. Dung dịch gốc zearalenon, c 200 g/ml. Cho 4,0 ml axetonitril (4.11) vào 5 mg zearalenon (4.22) để tạo thành dung dịch có nồng độ khối lượng khoảng 1,25 mg/ml. Pha loãng 800 l dung dịch này đến 5 ml bằng axetonitril (4.11) để tạo thành dung dịch gốc có nồng độ khoảng 200 g/ml. Bảo quản dung dịch này trong tủ lạnh đông ở - 18 °C đến - 20 °C. Để dung dịch đạt đến nhiệt độ phòng trước khi mở. Dung dịch được bảo quản theo cách này bền được 12 tháng. Xác nhận lại nồng độ khối lượng của dung dịch nếu để lâu hơn sáu tháng.
Pha loãng 250 l dung dịch gốc (4.23) với 4,75 ml axetonitril (4.11) để tạo thành dung dịch có nồng độ khối lượng khoảng 10 g/ml. Để xác định nồng độ chính xác, ghi lại đường hấp thụ của dung dịch này ở bước sóng trong khoảng từ 200 nm tới 300 nm trong cuvet thạch anh 1 cm của máy đo phổ (5.25) với axetonitril (4.11) làm dung dịch so sánh. Xác định bước sóng cho độ hấp thụ cực đại (A khoảng 274 nm). Tính nồng độ khối lượng của zearalenon, zon, tính bằng microgam trên mililit sử dụng công thức (1): zon =  (1)
Trong đó: Amax là độ hấp thụ xác định được tại điểm cực đại của đường hấp thụ (274 nm); M là khối lượng phân tử của zearalenon, tính bằng gam trên mol (M = 318,4 g/mol); là hệ số hấp thụ phân tử của zearalenon trong axetronitril (4.11), tính bằng mét vuông trên mol, (1 262 m2/mol, xem [1]); b là chiều dài đường quang của cuvet thạch anh, tính bằng xentimet (cm). Bảo quản dung dịch này trong tủ lạnh đông ở - 18 °C đến - 20 °C. Để dung dịch đạt đến nhiệt độ phòng trước khi mở. Dung dịch được bảo quản theo cách này bền được 12 tháng. Xác nhận lại nồng độ khối lượng của dung dịch nếu để lâu hơn sáu tháng.
Chuyển một lượng dung dịch thêm chuẩn (4.24) chứa tương ứng với 10 g zearalenon sang một lọ (5 9) khác hoặc bình định mức đã hiệu chuẩn (5.10). Thêm axetonitril (4.11) để thu được tổng thể tích là 5 ml. Bảo quản dung dịch này trong tủ lạnh đông ở - 18 °C đến - 20 °C. Để đạt đến nhiệt độ phòng trước khi mở. Dung dịch được bảo quản theo cách này có thể bền được 12 tháng. Xác nhận lại nồng độ khối lượng của dung dịch nếu để quá sáu tháng.
Chuyển một lượng dung dịch thêm chuẩn (4.24) chứa tương ứng với 2 g zearalenon sang một lọ (5.9) khác hoặc bình định mức đã hiệu chuẩn (5.10). Thêm axetonitril (4.11) với tổng thể tích là 5 ml. Bảo quản dung dịch này trong tủ lạnh đông ở - 18 °C đến - 20 °C. Để dung dịch đạt đến nhiệt độ phòng trước khi mở. Dung dịch được bảo quản theo cách này có thể bền được 12 tháng. Xác nhận lại nồng độ khối lượng của dung dịch nếu để quá sáu tháng. 5. Thiết bị, dụng cụ 5.1. Yêu cầu chung Sử dụng dụng cụ thủy tinh thông thường của phòng thử nghiệm và cụ thể như sau: 5.2. Máy nghiền tốc độ cao hoặc máy đông hóa. 5.3. Cân phân tích, có thể cân đến 0,000 1 g. 5.4. Cân kỹ thuật, có thể cân đến 0,1 g. 5.5. Máy lắc ngang hoặc máy lắc đứng có thể điều chỉnh được tốc độ. 5.6. Máy trộn Vortex, hoặc loại tương đương. 5.7. Máy xay, có các loại rây khác nhau. 5.8. Máy trộn. 5.9. Lọ thủy tinh, có các kích cỡ khác nhau. 5.10. Bình định mức, dung tích 3 ml, 5 ml và 10 ml. 5.11. Cốc có mỏ, dung tích 250 ml. 5.12. Bình nón, có nắp vặn hoặc nắp bằng thủy tinh dung tích 100 ml, 250 ml và 500 ml. 5.13. Giấy lọc, định tính, dai, chảy nhanh, đường kính 24 cm, cỡ lỗ 30 m, được gấp nếp trước hoặc loại tương đương. 5.14. Bộ lọc vi sợi thủy tinh, ví dụ, cỡ lỗ 1,6 m hoặc tương đương. 5.15. Pipet, ví dụ, dung tích 25 l đến 250 l, 1 ml, 5 ml và 10 ml. 5.16. Xyranh hoặc micropipet, kín khí, ví dụ dung tích 100 l, 500 l, 1 000 l. 5.17. Hệ thống tự động hoặc hệ thống chân không, thích hợp với các cột ái lực miễn nhiễm. 5.18. Bầu chứa, dung tích từ 50 ml đến 75 ml và các bộ phận để gắn với cột ái lực miễn nhiễm. 5.19. Xyranh bằng chất dẻo, dung tích 5 ml. 5.20. Bơm chân không, ví dụ có thể hút chân không 1 kPa và/hoặc bơm 18 l/min. 5.21. Hệ thống lọc chân không để lọc dung môi, được gắn với bộ lọc vi sợi thủy tinh 47 mm. 5.22. Bộ lọc xyranh dùng một lần, bằng nylon có cỡ lỗ 0,45 m. Trước khi sử dụng, kiểm tra zearalenon có bị thất thoát trong quá trình lọc hay không (phép thử độ thu hồi). CHÚ THÍCH Các vật liệu lọc khác dùng để có thể giữ lại zearalenon.
Cột Phenomenex Prodigy® ODS 31) (150 mm x 4,6 mm đường kính trong, cỡ hạt 5 m, cỡ lỗ 25 m) hoặc Spherisorb® 1) ODS-2 Excel (250 mm x 4,6 mm đường kính trong, cỡ hạt 5 m, cỡ lỗ 25 m) cho thấy phù hợp khi sử dụng pha động A (4.16). Cột Supelcosil® 1)(C18), (kích thước 250 mm x 4,6 mm đường kính trong, cỡ hạt 5 m, cỡ lỗ 18 m) được nhồi 12 % cacbon hoặc loại tương tự cho thấy phù hợp khi được sử dụng với pha động B (4.20).
6. Cách tiến hành 6.1. Chiết 6.1.1. Chiết bột đại mạch, bột ngô, bột ngô nhuyễn, bột mì và thức ăn chứa ngô dành cho trẻ nhỏ Cân 25 g phần mẫu thử đã nghiền, chính xác đến 0,1 g, cho vào cốc có mỏ (5.11). Thêm 100 ml dung môi chiết A (4.14). Đồng hóa 3 min trong máy đồng hóa (5.2) ở tốc độ cao. Lọc dịch chiết qua giấy lọc (5.13). Chuyển 88 ml PBS (4.10) vào bình nón (5.12). Dùng pipet (5.15) cho 12 ml dịch lọc và lắc để trộn kỹ bằng tay. Nếu khi thêm phần dịch lọc vào PBS mà mẫu trở nên vẩn đục thì lọc qua giấy lọc vi sợi thủy tinh (5.14) trước khi làm sạch. 6.1.2. Chiết ngũ cốc dành cho trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ Cân 20 g phần mẫu thử, chính xác đến 0,1 g, cho vào bình nón có nắp vặn (5.12). Thêm 150 ml dịch chiết dung môi B (4.17). Lắc nhanh bằng tay trong vài giây để thu được huyền phù đồng nhất, sau đó lắc thêm 1 h trong máy lắc (5.5) hoặc cho vào bể siêu âm (5.23) 15 min và lắc tiếp trên máy lắc (5.5) 15 min. Lọc dịch chiết qua giấy lọc gấp nếp (5.13) và thu lấy dịch chiết vào bình nón dung tích 100 ml (5.12). Chuyển chính xác 30 ml phần dịch chiết đã lọc vào ống đong dung tích 150 ml có nắp đậy. Pha loãng dịch chiết trong ống đong bằng PBS (4.10) đến thể tích cuối cùng 150 ml. Lắc và lọc khoảng 20 ml dịch chiết này qua màng lọc vi sợi thủy tinh (5.14) cho vào cốc có mỏ bằng thủy tinh bằng cách sử dụng chân không nhẹ (5.21). Loại bỏ 20 ml này và lọc tiếp thêm khoảng 70 ml để phân tích. CHÚ THÍCH Không sử dụng chân không mạnh khi bắt đầu quá trình lọc, có thể làm dịch chiết bị đục sau khi lọc Thực hiện ngay quy trình làm sạch trên cột ái lực miễn nhiễm (6.2).
Để cột ái lực miễn nhiễm đến nhiệt độ phòng trước khi làm ổn định. Nối cột ái lực miễn nhiễm (4.21) với hệ thống chân không (5.17) và gắn bầu chứa (5.18) lên đỉnh cột ái lực miễn nhiễm. Ổn định sơ bộ cột ái lực miễn nhiễm bằng 20 ml PBS (4.10) sử dụng tốc độ dòng 3 ml/min đến 5 ml/min. Chuyển 50 ml dung dịch chiết mẫu pha loãng (và có thể đã lọc) (xem 6.1.1 hoặc 6.1.2) vào bầu chứa. Rút dịch chiết qua cột bằng trọng lực với tốc độ dòng ổn định cho đến khi tất cả dịch chiết đã qua cột và phần dung môi cuối cùng qua cột. Cần có tốc độ dòng chảy là một giọt trên giây đến hai giọt trên giây. Sau khi dịch chiết qua cột, rửa cột dùng 20 ml nước hoặc đối với thức ăn cho trẻ nhỏ dùng 5 ml dung môi rửa (4.18) sau đó dùng 15 ml nước ở tốc độ một giây trên giây đến hai giọt trên giây. Loại bỏ nước còn dư ra khỏi cột ái lực miễn nhiễm ví dụ bằng 3 ml khí hoặc cho khí nitơ qua cột. Loại bỏ hết dịch rửa giải ở giai đoạn này của quá trình làm sạch. CHÚ THÍCH 1 Các điều kiện trên đây để ổn định sơ bộ cột và rửa giải có thể thay đổi theo hướng dẫn của nhà sản xuất cột. CHÚ THÍCH 2 Cần cẩn thận để không vượt quá khả năng của cột ái lực miễn nhiễm. 6.3. Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 6.3.1. Chuẩn bị mẫu bột đại mạch, bột ngô, bột mì, bột ngô dạng nhuyễn, thức ăn có chứa ngô dành cho trẻ nhỏ Đặt lọ (5.9) dưới từng cột ái lực miễn nhiễm. Dùng pipet lấy 1,5 ml axetonitril (4.11) cho vào bầu chứa của cột (5.18). Để cho dung môi tiếp xúc với cột ái lực miễn nhiễm 1 min sau đó rửa giải zearalenon ra khỏi cột ái lực miễn nhiễm bằng cách để dung môi qua cột ở tốc độ một giọt trên giây đến hai giọt trên giây. Đảm bảo đã thu nhận được tất cả dung môi, ví dụ cho 5 ml không khí đi qua cột. Làm bay hơi dịch rửa giải thu được đến khô bằng dòng khí nitơ. Hòa tan phần còn lại thu được trong 1 ml dung môi bơm dùng cho HPLC A (4.15). Trộn kỹ trên máy trộn vortex (5.6). Chuyển vào lọ nhỏ (5.9). Ngoài ra, dịch rửa giải có thể được pha loãng đến thể tích xác định (ví dụ 3 ml) bằng cách thêm nước và sau đó được phân tích bằng HPLC. 6.3.2. Chuẩn bị mẫu ngũ cốc dành cho trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ Đặt bình định mức dung tích 3,0 ml (5.10) dưới cột và cho 0,75 ml metanol (4.12) đi qua cột, thu lấy dịch rửa giải. Sau khi những giọt metanol cuối cùng chảy qua cột, để metanol còn giữ trên cột khoảng 1 min. Sau đó thêm tiếp 0,75 ml metanol và tiếp tục thu lấy dịch rửa giải. Cẩn thận cho không khí đi qua cột để thu được những giọt cuối cùng. Đổ đầy nước đến vạch của bình định mức và lắc. Trong trường hợp mẫu đục, lọc dung dịch thử qua bộ lọc xyranh HPLC (5.22) với xyranh bằng chất dẻo (5.19). CHÚ THÍCH 1 Khi trộn, metanol và nước bị co ngót thể tích. Điều chỉnh thể tích sau khi lắc, nếu cần. CHÚ THÍCH 2 Ngoài quy trình làm sạch và rửa giải ái lực miễn nhiễm thủ công (xem 6.3.1 và 6.3.2) còn có thể thực hiện với bộ chuẩn bị mẫu tự dộng, với điều kiện là khối lượng và tốc độ rửa giải không thay đổi.
Sử dụng dung dịch chuẩn (4.25) để xác định độ thu hồi theo quy trình thêm chuẩn. Mức thêm chuẩn phải nằm trong dải hiệu chuẩn (tốt nhất là giữa dải nồng độ). Để yên mẫu thêm chuẩn tối thiểu 30 min cho bay hết dung môi. 7. Phân tích HPLC
Khi sử dụng cột quy định trong 5.24.3 và pha động quy định trong 4.16 hoặc 4.20, việc cài đặt sau đây cho thấy phù hợp, xem Hình A.1 và Hình A.2: - tốc độ dòng pha động (cột): 0,7 ml/min đến 1,0 ml/min; - detector huỳnh quang, bước sóng phát xạ: 446 nm đến 450 nm; - detector huỳnh quang, bước sóng kích thích: 274 nm đến 275 nm; - thể tích bơm 100 l đến 300 l. 7.2. Chuẩn bị dung dịch hiệu chuẩn cho HPLC Dùng pipet (5.15) hoặc xyranh (5.16) để chuẩn bị năm dung dịch hiệu chuẩn HPLC trong các bình định mức dung tích 10 ml riêng rẽ, chuyển các thể tích nêu trong Bảng 1 và Bảng 2 thích hợp đối với các mẫu. Pha loãng đến vạch từng dung dịch bằng dung môi bơm thích hợp cho HPLC (4.15 đối với Bảng 1 hoặc 4.19 đối với Bảng 2). Bảng 1 - Chuẩn bị dung dịch hiệu chuẩn HPLC đối với thức ăn dành cho trẻ nhỏ có chứa ngô, bột đại mạch, bột ngô, bột mì, bột ngô dạng nhuyễn
Bảng 2 - Chuẩn bị dung dịch hiệu chuẩn HPLC đối với ngũ cốc dành cho trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ
Việc chuẩn bị các dung dịch hiệu chuẩn có thể được thực hiện bằng cách sử dụng các pipet khác nhau hoặc bằng các lọ thủy tinh đã hiệu chuẩn. 7.3. Đường chuẩn Chuẩn bị đường chuẩn ngay khi bắt đầu ngày phân tích bằng cách bơm dung dịch hiệu chuẩn thích hợp đối với mẫu thử (xem Bảng 1 hoặc Bảng 2) vào hệ thống HPLC. Thiết lập đường chuẩn trước để phân tích mẫu thử bằng cách dựng đồ thị nồng độ khối lượng zearalenon, tính bằng nanogam trên mililit, trên trục x dựa vào dấu hiệu pic như diện tích hoặc chiều cao trên trục y, kiểm tra độ tuyến tính sử dụng hồi quy tuyến tính (r2 0,998). 7.4. Xác định zearalenon trong dung dịch mẫu thử Bơm các lượng dịch dung dịch mẫu thử (6.3.1 hoặc 6.3.2) vào hệ thống HPLC sử dụng các điều kiện như đã dùng để chuẩn bị đường chuẩn. 7.5. Nhận biết pic Nhận biết các pic zearalenon trong dung dịch mẫu thử bằng cách so sánh thời gian lưu của dung dịch mẫu với thời gian lưu gần giống nhất của chất chuẩn được bơm vào HPLC. Nồng độ khối lượng của zearalenon trong dung dịch mẫu thử phải nằm trong dải hiệu chuẩn. Nếu mức zearalenon trong dung dịch mẫu thử vượt quá nồng độ khối lượng chuẩn lớn nhất thì pha loãng mẫu với pha động HPLC, để đưa nồng độ về trong dải hiệu chuẩn và phân tích lại. Hệ số pha loãng phải được đưa vào tất cả các phép tính tiếp theo. 8. Tính kết quả Xác định nồng độ khối lượng zearalenon trong dung dịch mẫu thử (6.3.1 hoặc 6.3.2) trực tiếp từ đường chuẩn (7.3), tính bằng nanogam trên mililit. Tính khối lượng của zearalenon, wzon, tính bằng nanogam trên gam, sử dụng công thức (2): wzon =  (2)
Trong đó: a là nồng độ khối lượng của zearalenon trong phần dung dịch thử được bơm và được xác định từ đường chuẩn, tính bằng nanogam trên mililit (ng/ml); V1 là thể tích của dung môi chiết (100 ml đối với 6.1.1 hoặc 150 ml đối với 6.1.2), tính bằng mililit (ml); V2 là thể tích thu được sau rửa giải khỏi cột ái lực miễn nhiễm và sau khi hòa tan lại với pha động (1,0 ml hoặc 3,0 ml), tính bằng mililit (ml); V3 thể tích của phần dịch chiết được sử dụng để làm sạch cột ái lực miễn nhiễm (6 ml đối với 6.1.1 và 10 ml đối với 6.1.2), tính bằng mililit (ml); ms là khối lượng mẫu thử được lấy để phân tích (25 g đối với 6.1.1 và 20 g đối với 6.1.2). Các kết quả này được tính bằng công thức đơn giản sau: wzon = a x 0,667 (đối với các mẫu được chuẩn bị theo 6.1.1. thể tích cuối cùng là 1 ml); wzon = a x 2,0 (đối với các mầu được chuẩn bị theo 6.1.1, thể tích cuối cùng là 3 ml); wzon = a x 2,25 (đối với các mẫu được chuẩn bị theo 6.1.2, thể tích cuối cùng là 3 ml). 9. Độ chụm Каталог: data -> 2017 2017 -> Tcvn 6147-3: 2003 iso 2507-3: 1995 2017 -> Các Cục Hải quan tỉnh, thành phố 2017 -> TIÊu chuẩn quốc gia tcvn 10256: 2013 iso 690: 2010 2017 -> Căn cứ Nghị định số 15/2017/NĐ-cp ngày 17/02/2017 của Chính phủ quy định chức năng, nhiệm vụ, quyền hạn và cơ cấu tổ chức của Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn 2017 -> TIÊu chuẩn quốc gia tcvn 8400-3: 2010 2017 -> TIÊu chuẩn nhà NƯỚc tcvn 3133 – 79 2017 -> Căn cứ Luật Tổ chức chính quyền địa phương ngày 19 tháng 6 năm 2015 2017 -> Căn cứ Nghị định số 15/2017/NĐ-cp ngày 17 tháng 02 năm 2017 của Chính phủ quy định chức năng, nhiệm vụ, quyền hạn và cơ cấu tổ chức của Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn 2017 -> Btvqh10 ngày 25 tháng 5 năm 2002 của Ủy ban Thường vụ Quốc hội về tự vệ trong nhập khẩu hàng hóa nước ngoài vào Việt Nam tải về 0.72 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|