4. PHÂN TÍCH FLAVONOID TỔNG THEO PHƢƠNG PHÁP
ALUMINIUM CHLORIDE COLORIMETRIC (ESWARI ET AL., 2013).
Hút 1 mL dịch trích vào ống nghiệm, cho thêm 3 mL ethanol, 0,2 mL
a uminum ch oride (10%), 0,2 mL sodium acetate 1M và 5,8 mL nƣớc cất.
Giữ ở nhiệt độ phòng 30 phút và đo độ hấp thu của hỗn hợp phản ứng ở 415 nm.
Đƣờng chuẩn Quercetin (mg QE/L): y=0,0054*x + 0,0026 với R
2
=0,9995.
Hàm ƣợng F avonoid (FC) đƣợc tính theo công thức:
FC (mg QE/g nguyên liệu khô) =
Trong đó, OD à độ hấp thu của mẫu ở 415 nm; V là thể tích dịch trích (L), W
là khối ƣợng mẫu (g).
5. PHÂN TÍCH HOẠT TÍNH CHỐNG OXY DỰA VÀO KHẢ NĂNG
LOẠI BỎ GỐC TỰ DO-DPPH, KHẢ NĂNG KHỦ SẮT FRAP, TỔNG
NĂNG LỰC KHỬ CHỈ SỐ CHỐNG OXY HÓA AAI.
- Phân tích DPPH theo phƣơng pháp đƣợc mô tả bởi Aluko et al. (2014).
Hút 1ml dung dịch 2,2 diphenyl 1-2-pycrylhydrazyl (DPPH) 0,135 mM trong
ethanol và 1ml dịch trích ly nguyên chất. Giữ trong tối 30 phút, đo hấp thu ở
bƣớc sóng 517 nm.
DPPH (%)= [(Abs control – Abs samp e) /Abs contro ]*100, trong đó Abs
contro à độ hấp thu của DPPH pha trong ethano , Abs samp e à độ hấp thu
của các mẫu dịch trích + DPPH hoặc chất chuẩn .
-phân tích FRAP theo phƣơng pháp đƣợc mô tả bởi Adedapo et al.(2009)
Hút 150
l dịch trích nguyên chất và 2850
l dung dịch FRAP cho vào ống
nghiệm, lắc đều bằng vortex. Ủ trong điều kiện tối 30 phút, sau đó đo hấp thu
ở 593nm. Khả năng khử sắt của các mẫu đƣợc xác định bởi đƣờng chuẩn
FeSO
4
.7h
2
0. Kết quả thể hiện là
M FeSO
4
/g DM.
-phân tích AAI theo phƣơng pháp đƣợc mô tả bởi (Nguyễn Thị Minh Tú,
2009)
Hút 2ml dịch trích nguyên chất cho vào ống nghiệm. cho thêm 2,5 ml dung
dịch đêm phosphat và 2,5 m ka i ferricyanide (1%) ắc đều với vortex ủ 50
o
C
trong 20 phút. Tiếp theo cho 2,5 ml trichloroacetic acid (10%) ly tâm với tốc
độ 3000 vòng / phút trong 10 phút , sau đó ấy 2,5 ml dung dịch trên bề mặt
pha với 2,5ml ethanol (96%) và 0,5ml ferricchloride (0,1%) lắc đồi với vortex
thực hiệ tƣơng tự mẫu kiễm chứng bằng nƣớc cất. Tiến hành đo hấp thu bƣớc
sóng là 700nm.
Pc9
Chỉ số chống oxy hóa AAI = A sample / A control
Trong đó A samp e độ hấp thu của mẫu, A contro độ hấp thu của mẫu kiểm
chứng.
Chia sẻ với bạn bè của bạn: |
