TrƣỜng đẠi học an giang khoa nông nghiệp và TÀi nguyên thiên nhiêN
tải về 4.19 Mb. Chế độ xem pdf
|
- Điều hướng trang này:
- 3. PHÂN TÍCH TANNIN THEO PHƢƠNG PHÁP FOLIN-DENIS (LAITONJAM VÀ CS., 2013)
| 2. PHÂN TÍCH HÀM LƢỢNG PHENOLIC
Đƣợc phân tích bằng phƣơng pháp Fo in-Ciocalteu (Hossain và cs., 2013). Nguyên tắc: dựa vào phản ứng oxy hóa các hợp chất polyphenol bằng thuốc thử Folin-Ciocalteau tạo ra sản phẩm màu xanh thẫm. Cƣờng độ màu của hỗn hợp phản ứng tỷ lệ thuận với nồng độ polyphenol trong mẫu. Căn cứ vào cƣờng độ màu đo đƣợc trên máy so màu ở bƣớc sóng 750 nm và đồ thị đƣờng chuẩn acid ga ic để xác định hàm ƣợng polyphenol trong mẫu. Thuốc thử Folin-Cioca teu 10%. T nh ƣợng thƣớc thử cần dùng rồi pha với nƣớc cất, tỉ lệ pha loãng Folin-Cioca teu:nƣớc cất là 1:9. Chuẩn bị dung dịch thuốc thử trong ngày sử dụng. Để tránh nhiễm bẩn thuốc thử Folin-Ciocalteu đậm đặc, loại bỏ thuốc thử đã chuẩn bị nhƣng chƣa sử dụng. Na 2 CO 3 5%. Cân 50 g natri cacbonat khan (Na 2 CO 3 ) cho vào bình định mức một vạch 1000 m . Thêm 950 mL nƣớc cất ( thêm khoảng phân nữa đủ đến nửa bình lắc đều rồi thêm hết phần còn lại). Lắc để hòa tan natri cacbonat, để nguội đến nhiệt độ phòng, pha loãng bằng nƣớc đến vạch và trộn. Chú thích: dung dịch này bền đến 1 tháng ở nhiệt độ phòng. Tiến hành: hút 0,2 ml dịch chiết đã pha oãng th ch hợp vào ống nghiệm, thêm 1,5 mL thuốc thử Folin-Ciocalteau 10%. Giữ ống nghiệm ở trong tối 5 phút. Cuối cùng, cho thêm 1,5 mL Na 2 CO 3 5% và lắc đều bằng máy vortex. Giữ ống nghiệm trong tối 2 giờ. Sau đó, đo độ hấp thu của dung dịch ở bƣớc sóng 750 nm bằng UV-spectrophotometer. Dung dịch chuẩn gốc axit gallic: dựng đƣờng chuẩn acid gallic với các mẫu 10 μg, 20 μg, 30 μg, 40 μg, và 50 μg. Thực hiện quy trình tƣơng tự nhƣ trên cho acid gallic chuẩn. Phƣơng trình đƣờng chuẩn. 3. PHÂN TÍCH TANNIN THEO PHƢƠNG PHÁP FOLIN-DENIS (LAITONJAM VÀ CS., 2013) Hút 0,5 mL dịch tr ch và 0,5 mL nƣớc cất cho vào ống nghiệm. Sau đó cho tiếp 0,5 mL thuốc thử Folin-Denis và 2 mL dung dịch Na 2 CO 3 20% lắc đều, làm ấm bằng bể nƣớc sôi trong 1 phút và làm nguội ở nhiệt độ phòng. Đo độ hấp thu của phức màu ở bƣớc sóng 700 nm. Pc8 Đƣờng chuẩn acid tannic (mg TAE/L): y = 0,0098*x +0,0478 với R 2 = 0,9996. Hàm ƣợng tannin (TC) đƣợc tính theo công thức: TC (mg TAE/g nguyên liệu khô) = Trong đó, OD à độ hấp thu của mẫu ở 700 nm; V là thể tích dịch trích (L), W là khối ƣợng mẫu (g). tải về 4.19 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|