Trang chủ > Góc chuyên gia > Công nghệ sinh học 17 tháng 06 2019 Mục lục MÁY ĐIỆn di
Hình 1.5. Mặt sau lược, lắp trên vành của khuôn đúc, vị trí lược tron gel. Hai ốc hiệu lược chỉnh
tải về 0.87 Mb. Chế độ xem pdf
|
Bảng thành phần hóa học của các Mác thép không gỉ, 00050000953, 44620
- Điều hướng trang này:
- 1.3.3. Vận hành điện di
- Van inox Ống inox Phụ kiện đường ống inox Máy bơm nước Thiết bị bồn tank inox Ảnh Video News
|
Hình 1.5. Mặt sau lược, lắp trên vành của khuôn đúc, vị trí lược tron gel. Hai ốc hiệu lược chỉnh. Để tạo hai rãnh, đặt lược thứ hai vào giữa gel Đổ dung dịch agaroza được làm lạnh đến 50oC vào khuôn đúc. Định hướng lược để các bề mặt lược gần miếng đệm bọt nhất và đặt nó lên cạnh khay. Lược luôn luôn ở vào vị trí thẳng đứng để tránh sự vặn vẹo hình dạng. Để chạy lượng mẫu gấp 2 lần, đặt lược thứ hai vào chính giữa khay. Cho phép thời gian tối thiểu để gel đặc lại là 30 phút. Khi gel đã kết lại, lần lượt tháo lược cẩn thận. Nhấc một phần và nghiêng nhẹ một đầu của lược, sau đó rút từ từ ra khỏi gel (kéo thẳng lược, tạo ra một khoảng không để có thể nhấc gel ra khỏi khay) Tháo khay di động và gel bằng cách nắm lấy tau cầm của khay, ấn đầu áp vào miếng bọt đệm. Khi khay đã đã sạch đêm thì nhấc ra. Chuyển khay và gel tới chỗ mát. 1.3.3. Vận hành điện di 1. Làm lạnh nền trước khi tiến hành. Đặc biệt khi dùng điện áp cao hơn hoặc sự phân ly quy định là trên 30 phút. Chú ý: Để tiến hành phân ly, hoặc là thêm 0.5 mg/ml etydi bromua vào dung dịch đêm hoặc thêm 50mg/ml etydi bromua vào bộ đệm mẫu. Để quan sát, hay cắt điện, tháo phần nắp và giữ đền cực tím gần gel. Thêm từ từ etydi bromua vào dung dịch đệm hay đệm mẫu. Phát hiện bằng phương pháp này không nhạy bằng cách nhuộm màu và nhìn qua thiết bị soi. 2. Đổ dung dịch vào các khoang sao cho đến khi đệm cao hơn gel khoảng 1mm (khoảng 220ml) 3. Nạp mẫu. Thêm mãu vào 5X bộ đệm tải mẫu và trộn (1/5 thể tích là đệm nạp vào). Sử dụng micropipette để nạp mẫu, chú ý tránh đâm thủng hoặc tạo nên nhiều bong bóng. Van inox Ống inox Phụ kiện đường ống inox Máy bơm nước Thiết bị bồn tank inox Ảnh Video News Góc chuyên gia 4. Đặt nắp để catot (-, dây đen) ở đoạn cuối gần mẫu nhất, (Mẫu axit nucleic di chuyển về phía anot, +, dây đỏ). Nối các dây màu (đỏ với đỏ, đen với đen) tới các nguồn điện, như là R=ESP 2A200. Đặt mức điện áp và thiết bị bấm giờ (nếu có sẵn) theo mức độ phân ly. Nhanh, điện áp cao Những ứng dung nào đó, như là kiểm tra các mẫu, có thể thực hiện nhanh dưới điều kiện điện áp cao. Làm lạnh (-20oC) và giới hạn thời gian vận hành 5 ph út hoặc ít hơn ở điện áp 500V. Chậm hơn, điện áp cao hơn Một gradient điện áp 12V/cm (150V) trong 30 ÷ 40 phút ( sử dụng dung dịch đệm 1% gel agaroza vaì 0,5 X TBE) cắt Hind III cuả lamda ADN thành các đoạn0,1 ÷ 23 kb. Hoặc dùng dung dịch như vật, mãu này có thể chạy ở 24 V/cm (300V) thì có thể phân cắt trong 20 ÷ 30 phuït. Làm lạnh thiết bị trước khi tiến hành. Chú ý: Nếu khổng đổ thêm màu vào chất lỏng làm nguội thì đặt trên nền tối để quan sát dễ dàng hơn. Đặt thiết bị còn nóng lên nền được làm lạnh cso thể ảnh hượng đến nhiệt độ xung quanh. Nếu sự quá nhiệt không được kiểm soát, gel sẽ tan hoặc thiết bị sẽ cong. Etydi bromua là chất ăn da mạnh, nên cần mang bao tay Đeo kính chắn tia UV và bảo vệ da khi sử dụng đèn UV Tính gradient điện áp, chia điện áp đặt vào cho khoảng cách giữa các cực 12.7 cm. tải về 0.87 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|