Trang chủ > Góc chuyên gia > Công nghệ sinh học 17 tháng 06 2019 Mục lục MÁY ĐIỆn di
Bảng 1.3. Nồng độ để điện di của các mảnh vỡ AND đối với các loại chất khác
tải về 0.87 Mb. Chế độ xem pdf
|
Bảng thành phần hóa học của các Mác thép không gỉ, 00050000953, 44620
| Bảng 1.3. Nồng độ để điện di của các mảnh vỡ AND đối với các loại chất khác
Những nhân tố ảnh hưởng đến kết quả quá trình phân ly bao gồm: chất đệm, điện áp đặt vào, nhiệt độ, cấu tạo và sự có mặt của etydi bromua, các agaroza đặc biệt có sẵn. Tiêu chuẩn chung cho đoạn Hind III phage λ. Loại cho 8 mảnh vỡ sắp xếp trong khoảng từ 0.1 đến 23 kb cho mỗi cặp 2 sợi. Để phân giải tốt, di chuyển trên đoạn 10 cm mất 45 phút 1% gel agaroza trong gel 0,5 X TBE ở điện áp 150V. Tính điện di của ARN ARN có thể phân chia dựa theo kích thước cơ bản. Để tránh tác động đến thời kỳ chuyển hóa cấu trúc ARN được biến tính trước hay suốt thời gian điện di VD: ARN đã biến tính trước với glyoxal và glyoxal sunfoxit có thể gel agaroza độc lập, hay ARN có thể Gel agaroza độc lập, hay ARN có thể bị cắt phân đoạn. Gel agaroza chứa hydroxyt thủy ngân II metyl hay focmaldehyt. 1.3.3.Sự phát hiện AND AND có thể được phát hiện nhờ sự phát huỳnh quang của liên kết etydi bromua (C2H10BrN3) hay nhờ phương pháp chụp ảnh bằng tia X của đồng vị phóng xa AND. Etydi bromua (0,5 µg/ml) có thể được thêm vào dung dịch đệm di chuyển, để quan sát sư biến động của mẫu, vì sự phát huỳnh quang của thuốc nhuộm dưới tác dụng của tia cực tím sẽ được biểu hiện ở dạng dải (để xác định được sự biến đổi đó, tắt nguồn cung cấp năng lượng và chuyển đổi thành phần agaroza cũ ra nắp thiết bị định tia cực tím gần khay vẫn hành. Đặt nắp lại và bật đền để bắt lại sự điện di. Ngoài ra, sau khi điện di, gel biến màu trong dung dịch hòa tan (edydi bromua 10,5 µg/ml H2O) khoảng từ 10 đến 60 phút rồi quan sát và chụp ảnh mẫu bằng phương pháp chiếu tia cực tím. Để chụp ảnh gel, dùng phương pháp chiếu tia cực tím trên bề mặt tại mỗi vị trí ở đĩa vận hành hoặc di chuyển nhẹ bản gel trên bề mặt sẽ quan sát được tối đa (đĩa vận hành có 95% ánh sang trắng với bước sóng 254mm và 40% ánh sáng trắng với bước sóng 254mm). Quan sát mẫu bằng tia cực tím ở bước sóng 366mm hoặc làm giảm cường độ tia cực tím xuống 302mm để giảm sự phát huỳnh quang của etydi bromua không liên kết, gel có thể bị mất màu bởi sự hút ẩm của nó trong 5 phút với MgCl2 0.01M hoặc trong 1 giờ với MgSO4 0.001M. Sự mất màu đã tạo nên điều kiện dễ dàng để phát hiện hàm lượng AND nhỏ. 1.3.6. Những chú ý cần thiết Nắp an toàn phải được lắp trước khi nối nguồn điện với nguồn cung cấp năng lượng. Tất cả các công tắc điện và ngắt nguồn cung cấp điện trước khi tháo lắp an toàn. Trước khi sử dụng lần đầu, làm đầy lỗ với 1 lượng 600ml 50/50 etylen glycol/ nước để ngăn chặn sự tổn thất không thể hồi phục cho thiết bị. Lỗ chứa lượng trên có thể đổ đầy ngay cả khi không cần làm lạnh theo yêu cầu. Không sử dụng nước cất, chất chống đông thương mại hoặc bất kỳ dung môi hữu cơ nào để đổ vào lỗ đó. Nước được lấy ra khi đóng băng. Nếu không nó bị hút vào bên trong dung dịch và phá vỡ liên kết. Dung môi hữu cơ sẽ gây ra sự tổn thất hóa chất không thể hồi phục cho thiết bị. Không làm lạnh lượng dung dịch cho vào lỗ dưới −200C (−40F). Có thể làm lạnh lượng dung dịch đó trong thùng đá, máy làm lạnh hoặc trong tủ lạnh. Không điều chỉnh nhiệt độ dung dịch đệm hoặc gel trên 50oC. Ngăn chặn sự đun nóng quá nhiệt bằng cách làm lạnh lượng dung dịch đó trước khi sử dụng. Để ngăn chặn sự đun nóng quá nhiệt trong quá trình kéo dài chạy điện áp cao, tải về 0.87 Mb. Chia sẻ với bạn bè của bạn:
|