MỞ ĐẦu tính CẤP thiẾt cỦa đỀ tài


* Xác định gen kháng rầy nâu bph14



tải về 1.99 Mb.
trang20/21
Chuyển đổi dữ liệu15.05.2018
Kích1.99 Mb.
#38490
1   ...   13   14   15   16   17   18   19   20   21

* Xác định gen kháng rầy nâu bph14


Gen bph14 nằm trên cánh dài của NST số 3, đây là gen kháng rầy nâu đầu tiên được tạo dòng với kích thước gần 10 kb. Theo các nghiên cứu trước đây thì bph14 là gen có khả năng kháng với các quần thể rầy nâu phổ biến ở các nước châu Á [49], [71].

+ Khuếch đại gen bph14

Khuếch đại PCR trên DNA tổng số của các giống lúa IRRI 352, BG 367-2, Sài Đường Kiến An và Lốc Nước với các cặp mồi M1, M2, M3, M4. Kết quả trình bày ở hình 3.15.

Kết quả PCR với cặp mồi M1, các giống BG 367-2, Sài Đường Kiến An và Lốc Nước có băng DNA khuếch đại với kích thước khoảng 1500 bp, giống IRRI 352 không có băng DNA. Kích thước này tương đồng với kích thước của sản phẩm PCR dự kiến khi thiết kế cặp mồi M1 (Hình 3.15 A).

Trong khi đó, phản ứng PCR với cặp mồi M2 cho kết quả thể hiện ở hình 3.15 B: giống Sài Đường Kiến An và Lốc Nước có băng DNA được khuếch đại với kích thước khoảng 1500 bp, xấp xỉ với kích thước dự kiến. Hai giống IRRI 352 và BG 367-2 không xuất hiện băng.

Kết quả PCR với cặp mồi M3 cho kết quả ở hình 3.15 C, băng khuếch đại có kích thước 1000 bp xuất hiện ở cả 4 giống lúa nghiên cứu. Các băng DNA khá rõ chứng tỏ tính đặc hiệu cao của mồi.

Kết quả PCR với cặp mồi M4 cho băng khuếch đại ở 3 giống lúa BG 367-2, Sài Đường Kiến An và Lốc Nước với kích thước khoảng 1000 bp. Còn giống IRRI 352 không có băng khuếch đại với cặp mồi này (Hình 3.15 D).



Như vậy, qua phân tích hình ảnh điện di cho thấy, các cặp mồi M1, M2 cho sản phẩm PCR thu được có kích thước khoảng 1500 bp; còn cặp mồi M3 và M4 cho sản phẩm PCR có kích thước khoảng 1000 bp. Các kích thước này tương đồng với kích thước của sản phẩm PCR dự kiến khi thiết kế các cặp mồi để khuếch đại trên chiều dài gen bph14. Trong 4 giống lúa nghiên cứu, giống lúa Sài Đường Kiến An và Lốc Nước có băng khuếch đại của cả 4 đoạn DNA. Với kết quả trên chúng tôi nhận định sơ bộ là hai giống lúa này có thể tồn tại đoạn DNA có trình tự tương đồng với vùng cds của gen bph14.










tải về 1.99 Mb.

Chia sẻ với bạn bè của bạn:
1   ...   13   14   15   16   17   18   19   20   21




Cơ sở dữ liệu được bảo vệ bởi bản quyền ©hocday.com 2024
được sử dụng cho việc quản lý

    Quê hương