AP1.15 Phổ EI-MS của hợp chất AP1.15

Phổ EI-MS của hợp chất AP1.15 cho pic ion phân tử ở m/z 428 cho giả thiết một công thức phân tử C₂₉H₄₈O₂ cho AP1.15.

Phổ ¹H-NMR của AP1.15 chỉ ra sự có mặt của các nhóm sau:

- 6 nhóm metyl trong đó có hai nhóm metyl bậc ba (3H, s) (δ_H 0,74 và 1,38), ba nhóm metyl bậc hai (3H, d) (δ_H 0,82, 0,84 và 0,92) và một nhóm metyl bậc một (3H, t) (δ_H 0,85);

- 2 proton của một nhóm metylen liền kề với một nhóm cacbonyl [δ_H 2,37 (1H, dt, J = 17,0 Hz, 3,0 Hz), 2,51 (1H, ddd, J = 17,0 Hz, 15,0 Hz, 5,0 Hz)];

- 1 nhóm oximetin [δ_H 4,35 (1H, dd, J = 2,5 Hz, 2,0 Hz)]; và

- 1 proton vinylic cô lập của một nối đôi thế ba lần [δ_H 5,81 (1H, s)].

Phổ ¹³C-NMR và DEPT của AP1.15 cho 29 tín hiệu cacbon 13; các tín hiệu này bao gồm:

- 6 nhóm metyl (6 q) (δ_C 11,9; 12,0; 18,7; 19,1; 19,5 và 19,8);

- 10 nhóm metylen (10 t) (δ_C 20,9; 23,1; 24,2; 26,1; 28,2; 33,9; 34,3; 37,1; 38,6 và 39,6);

- 9 nhóm metin (9 d) (δ_C 29,2; 29,8; 36,1; 45,9; 53,7; 55,9; 56,1; 73,3 và 126,3); và

- 4 cacbon (4 s) (δ_C 38,0; 42,5; 168,6 và 200,2).

Trong số các tín hiệu cacbon 13 có các tín hiệu của một nhóm cacbonyl liên hợp α,β không no [δ_C 200,2 (s), 168,6 (s) và 126,3 (d)] và một nhóm oximetin [δ_C 73,3 (d)]. Các tín hiệu này phù hợp với các tín hiệu proton của một nối đôi thế 3 lần ở δ_H 5,81 (1H, s) và của 1 nhóm oximetin δ_H ở 4,35 (1H, dd, J = 2,5 Hz, 2,0 Hz).

Từ các dữ kiện phổ EI-MS, ¹H-NMR, ¹³C-NMR và DEPT, chúng tôi đã giả thiết một cấu trúc stigmastan cho AP1.15. Từ giả thiết này, sự so sánh tiếp theo các tín hiệu cộng hưởng từ cacbon 13 của AP1.15 với của mẫu chuẩn β-sitosterol đã cho thấy khả năng liên kết của một nhóm hiđroxi vào vị trí C-6 và sự định vị của nhóm cacbonyl α,β không no là 4-en-3-on. Điều này hoàn toàn phù hợp với các giá trị δ và J của H-2 (1H, dt, J = 17,0 Hz, 3,0 Hz) và 2,51 (1H, ddd, J = 17,0 Hz, 15,0 Hz, 5,0 Hz) và H-6 (δ_H 4,35).

Hằng số tương tác của H-6 (dd, J = 2,5 Hz, 2,0 Hz) cho thấy H-6 có sự định hướng ­α, do đó nhóm hiđroxi phải được định hướng β.

Trên cơ sở các phân tích phổ này, cấu trúc của AP1.15 đã được xác định là 6β-hiđroxistigmast-4-en-3-on [8]. Stigmast-4-en-3,6-dion và stigmast-4-en-3,6-diol đã được phân lập trước đây từ Sambucus ebulus và Lagestroemia lancasterii, [15].

Hợp chất này lần đầu tiên được phát hiện trong một loài Alpinia (Zingiberaceae).

trans-3S,5S-Đihiđroxi-1,7-điphenyl-1-hepten (AP1.18.3)

Hợp chất AP1.18 đã được phân lập dưới dạng tinh thể hình kim màu vàng nhạt, đ.n.c. 75-77^oC từ phần chiết n-hexan (AP1), (hiệu suất phân lập 32,1 mg/g phần chiết AP1). Hợp chất này cho giá trị R_f = 0,23 (TLC, silica gel, n-hexan-axeton 4:1, v/v).

Phổ khối lượng (EI-MS) của hợp chất AP1.18.3 cho pic ion phân tử với cường độ yếu ở m/z 282 phù hợp với một công thức phân tử C₁₉H₂₂O_2­ (M^+.).

Phổ ¹H-NMR của hợp chất AP1.18.3 chỉ ra sự có mặt của các nhóm sau:

• 
  2 nhóm phenyl (10H, m) (δ_H 7,17-7,37);
  
• 
  2 nhóm oximetin (2 x 1H) [δ_H 3,96 (quintet, J = 6,5 Hz) và 4,54 (q, J = 6,5 Hz)];
  
• 
  một nối đôi thế 2 lần có cấu hình trans (J = 16,0 Hz) [δ_H 6,21 (dd, J = 16,0 Hz, 6,5 Hz) và 6,58 (d, J =16,0 Hz)]; và
  
• 
  3 nhóm metylen (3 x 2H) (δ_H 1,7-1,9 và 2,67-2,83).
  

• 
  2 nhóm phenyl (δ_C 125,9; 126,5; 127,8; 128,4; 128,5; 128,6; 136,6; và 141,9);
  
• 
  2 nhóm oximetin (2d) (δ_C 71,6 và 73,6);
  
• 
  một nối đôi thế 2 lần (2d) (δ_C 130,2 và 131,9); và
  
• 
  3 nhóm metylen (3t) (δ_C 31,7, 39,7 và 43,5).
  

Phổ EI-MS của AP1.18.3 cho sự phân mảnh ở m/z 264, 135, 133, 104, 91 (pic cơ sở) và 77 phù hợp với của trans-3S,5S-đihiđroxi-1,7-điphenyl-1-hepten được phân lập từ Alpinia katsumadai [19].

Hợp chất AP1.22 và AP3.13 đã được phân lập dưới dạng bột vô định hình màu trắng tương ứng từ phần chiết n-hexan (AP1) (hiệu suất phân lập 2,3 mg/g phần chiết AP1 và phần chiết etyl axetat (AP3) (hiệu suất phân lập 16,6 mg/g phần chiết AP3). Hợp chất này cho giá trị R_f = 0,21 (TLC, silica gel, n-hexan-EtOAc-HCOOH 15:15:1, v/v).

Phổ khối lượng (EI-MS) của hợp chất AP1.22 cho pic phân tử ở m/z 270 phù hợp với một công thức phân tử C₁₆H₁₄O₄ (M^+.).

Các sự phân mảnh ở m/z 269, 193, 166 (pic cơ sở), 138, 123 và 104 trên phổ EI-MS của AP1.22 phù hợp với của mẫu chuẩn alpinentin.

Sự phân mảnh của AP1.22 được biểu diễn trên Sơ đồ 6.

RDA (retro-Diels Alder)

Hợp chất AP3.4 (= AP1.20 = AP2.16) đã được phân lập dưới dạng bột vô định hình màu vàng từ phần chiết etyl axetat (AP3) (hiệu suất phân lập 22,8 mg/g phần chiết AP3) và các phần chiết n-hexan (AP1.20) (hiệu suất phân lập 35,6 mg/g phần chiết AP1) và điclometan (AP2.16) (hiệu suất phân lập 32,9 mg/g phần chiết AP2). Hợp chất này cho giá trị R_f = 0,14 (TLC, silica gel, n-hexan-axeton 6:1, v/v).

Phổ khối lượng (EI-MS) của AP3.4 cho pic ion phân tử ở m/z 270 cho giả thiết một công thức phân tử C₁₆H₁₄O₄ (M^+.) cho hợp chất AP3.4.

Phổ ¹H-NMR của AP3.4 chỉ ra sự có mặt của các nhóm sau:

- 1 nhóm metoxi liên kết với vòng thơm [δ_H 3,88 (3H, s)];

- 2 proton của một vòng benzen thế bốn lần 1′,2′,4′,6′ [δ_H 5,93 (1H, d, J = 2,5 Hz) và 6,03 (1H, d, J = 2,5 Hz)];

- 5 proton của một vòng benzen thế một lần [δ_H 7,42-7,48 (3H, m) và 7,71 (2H, dd, J = 8,0 Hz, 2,5 Hz)]; và

- 2 proton vinylic của một nối đôi thế hai lần, độ chuyển dịch hoá học của các tín hiệu proton này [δ_H 7,65 (1H, d, J = 16,0 Hz) và 7,82 (1H, d, J = 16,0 Hz)] cho thấy nối đôi này có thể được liên kết với một nhóm cacbonyl.

Phổ ¹³C-NMR và DEPT của AP3.4 cho 16 tín hiệu cacbon 13; các tín hiệu này có thể chia làm 15 tín hiệu của một cấu trúc chalcon giả thiết và một tín hiệu của một nhóm metoxi và khẳng định cho các nhóm được xác định bằng phổ ¹H-NMR. Các tín hiệu cộng hưởng từ cacbon 13 bao gồm:

- 1 nhóm cacbonyl (1s) (δ_C 191,6); độ dịch chuyển hoá học của tín hiệu cacbon 13 này cho thấy nó được liên hợp α,β với một nối đôi.

- Một nối đôi thế 2 lần 1,2 (2d) (δ_C 127,5 và 141,6);

- 1 nhóm metoxi (1q) (δ_C 55,9);

- 7 nhóm CH vòng thơm (7d) (δ_C 91,7; 95,8; 128,2; 128,9 và 130,1), trong đó 2 tín hiệu cộng hưởng đầu thuộc về một vòng benzen thế bốn lần 1′,2′,4′,6′ và 5 tín hiệu cộng hưởng tiếp theo thuộc về một vòng benzen thế một lần; và

- 4 C vòng thơm (4 s) (δ_C 134,9; 162,6; 164,9; và 166,1) của hai vòng benzen thế 4 lần 1′,2′,4′,6′ và một vòng benzen thế một lần.

Trên cơ sở các dữ kiện phổ trên của AP3.4 một cấu trúc của chalcon đã được xác định. Vòng A của chalcon bị thế 1′,2′,4′,6′ và vị trí cacbon số 2′ bị chiếm bởi một nhóm hiđroxi; nhóm này tạo liên kết hiđro với nhóm cacbonyl (δ_H 13,7, 1H, s, 2′-OH). Vòng B của chalcon là một nhóm phenyl. Nối đôi của chalcon đã được xác định là có cấu hình trans do tương tác lớn (J = 16,0 Hz) của H_α và H_β. So sánh các dữ kiện phổ của AP3.4 với các chalcon có cấu trúc tương tự đã xác định được cấu trúc của cardamomin của AP3.4 với nhóm metoxi liên kết với C-6′ [23].

Phổ khối lượng EI-MS của hợp chất AP3.4 cho sự phân mảnh ở m/z 270, 269, 193 (pic cơ sở), 138, 103 và 77 phù hợp với hợp chất cardamomin.

Sự phân mảnh của AP3.4 được biểu diễn trên Sơ đồ 7.