Một số phương pháp xác định hoạt độ enzyme Glucoamylase

Có chủ yếu là hai loại xét nghiệm được sử dụng để xác định hoạt động của glucoamylase. Một là dựa trên đo lượng đường khử bằng thuốc thử dinitrosalicylic axit (DNS) hoặc phương pháp Nelson – Somogyi, cách thứ hai là dựa trên giảm giá trị nhuộm của phức hợp tinh bột-iốt xanh. Phương pháp thứ hai, được phát triển bởi Fuwa và được sử dụng rộng rãi, dựa trên màu sắc phát triển mà kết quả từ iốt gắn với tinh bột polyme.

Phương pháp AOAC 994.09 xác định hoạt độ enzyme glucoamylase bằng cơ chất đặc hiệu là p-Nitrophenyl--glucopyranoside (PNPG). Enzyme glucoamylase thuỷ phân cơ chất trên trong điều kiện pH 4.3 và 50^oC. Sau phản ứng, sản phẩm tạo thành là glucose và p-nitrophenol có màu vàng đặc trưng. Dựa trên việc xác định cường độ màu của p-nitrophenol tạo thành, có thể xác định được hoạt độ của enzyme glucoamylase.

Hiện nay, nước ta vẫn chưa có một phương pháp nghiên cứu xác định hoạt độ enzyme γ-Amylase trong chế phẩm enzyme một cách toàn diện và được công nhận trên toàn quốc.

Phương pháp AOAC 994.09 cho kết quả chính xác, độ đặc hiệu cao, rất phù hợp phân tích các nền mẫu phức tạp. Do đó, chúng tôi lựa chọn phương pháp này để xây dựng dự thảo TCVN.

4. 
   
   
   
   tải về 73.5 Kb.
   
   Chia sẻ với bạn bè của bạn: