Từ viết tắt i
Viết đầy đủ i
CKS i
Chất kháng sinh i
DNA i
Deoxyribonucleic acid i
G(-) i
Gram âm i
G(+) i
Gram dương i
RNA i
Ribonucleic acid i
mRNA i
Messenger Ribonucleic acid i
tRNA i
Transfer ribonucleic acid i
VSV i
Vi sinh vật i
MỞ ĐẦU 1
Chương I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4
1.1. GIỚI THIỆU VỀ CHẤT KHÁNG SINH 4
1.1.1. Chất kháng sinh 4
1.1.2. Sơ lược lịch sử nghiên cứu CKS 5
1.1.3. Phân loại CKS 6
1.1.4. Cơ chế tác dụng của CKS 7
1.1.4.1. Ức chế tổng hợp thành tế bào 8
1.1.4.2. Phá hủy màng sinh chất 9
1.1.4.3. Ức chế tổng hợp protein 10
1.1.4.4. Ức chế các con đường trao đổi chất 11
1.1.4.5. Ức chế sự tổng hợp acid nucleic 12
1.1.5. Thực trạng kháng kháng sinh của các chủng VSV gây bệnh 14
1.2. PEPTIDE KHÁNG KHUẨN CECROPIN 16
1.2.1. Nguồn gốc của peptide kháng khuẩn 16
1.2.2. Phân bố tự nhiên của peptide kháng khuẩn 17
1.2.3. Cấu tạo của peptide kháng khuẩn 18
1.2.4. Tác động của peptide kháng khuẩn 20
1.2.4.1. Cơ chế tác động 20
1.2.4.2. Sự tác động chọn lọc của peptide kháng khuẩn 25
1.2.5. Ứng dụng của peptide kháng khuẩn 27
1.2.6. Peptide kháng khuẩn cecropin B 27
1.3. CHUYỂN GEN CECROPIN B VÀO TẾ BÀO VÀ CƠ THỂ ĐỘNG VẬT 29
1.4. GIỚI THIỆU VỀ NGUYÊN BÀO SỢI CHUỘT ĐƯỢC DÙNG ĐỂ CHUYỂN GEN CECROPIN B 32
1.4.1. Nguồn gốc và đặc điểm nguyên bào sợi 32
1.4.2. Ứng dụng của nguyên bào sợi nuôi cấy 33
1.5. ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT GÂY BỆNH 34
Chương II: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37
2.1. NGUYÊN LIỆU 37
2.1.1. Chủng giống 37
2.1.2. Hóa chất và dụng cụ 38
2.1.2.1. Hóa chất 38
Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở Các hóa chất sử dụng trong đề tài được liệt kê ở 38
Bảng 1: Các hóa chất được sử dụng trong đề tài 38
2.1.2.2. Môi trường và dung dịch 38
2.1.2.3. Dụng cụ và vật tư 39
2.1.2.4. Thiết bị 40
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41
2.2.1. Phương pháp nuôi cấy và cấy chuyển nguyên bào sợi chuột 41
Quy trình thí nghiệm được tóm tắt ở sơ đồ sau: 41
2.2.2. Phương pháp thu môi trường nuôi nguyên bào sợi chuột đã được chuyển gen cecropin B: 42
2.2.3. Phương pháp cô đặc môi trường nuôi nguyên bào sợi chuột đã được chuyển gen cecropin B 43
2.2.4. Phương pháp nhân nuôi và cất giữ vi khuẩn 44
2.2.5. Phương pháp đục lỗ 45
2.2.6. Phương pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn 47
Quy trình thí nghiệm được tóm tắt ở sơ đồ sau: 47
2.2.6.1. Phương pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn của chất kháng sinh 47
2.2.6.2. Phương pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn của peptide cecropin B: 48
2.2.6.3. Phương pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn của CKS kết hợp với peptide cecropin B: 49
2.2.6.4. Phương pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn của môi trường nuôi cấy nguyên bào sợi chuột chuyển gen cecropin B: 50
Chương III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 52
3.1. ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG KHÁNG SINH CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN GÂY BỆNH TRÊN NGƯỜI VÀ ĐỘNG VẬT 52
3.2. KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA PEPTIDE CECROPIN B 54
3.3. KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CECROPIN B KẾT HỢP VỚI KHÁNG SINH 57
3.3.1. Cecropin B gây nhạy cảm với kháng sinh ở chủng vi khuẩn kháng thuốc 57
3.3.2. Cecropin B làm tăng mức độ nhạy cảm kháng sinh ở chủng vi khuẩn không kháng thuốc 59
3.4. KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY NGUYÊN BÀO SỢI CHUỘT NHẮT TRẮNG CHUYỂN GEN CECROPIN B 61
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65
KẾT LUẬN 65
KIẾN NGHỊ 66
TÀI LIỆU THAM KHẢO 67